操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:MEK1/2變構(gòu)抑制劑(PD318088)
英文名稱:PD318088 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 PD318088是ATP非競爭性MEK1/2變構(gòu)抑制劑,,能與ATP同時結(jié)合于MEK1,,且其結(jié)合位點(diǎn)與ATP結(jié)合位點(diǎn)相鄰。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:391210-00-7 純度:99.35% 分子量:561.09 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,,否則將會增加空白吸收,,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測,。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
桔橙鏈霉菌Marinospirillum minutulum兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
黃曲霉Marinospirillum megaterium兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒
巴氏醋桿菌Bacillus subtilis subsp. subtilis兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒
大腸埃希菌Natrinema versiforme兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒
發(fā)酵乳桿菌*Rhizobium undicola兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒
葡萄座腔菌Natronorubrum tibetense兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒
氧化節(jié)桿菌Brevibacillus laterosporus兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒
白色假絲酵母Brevibacillus laterosporus 兔子組織型纖溶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒
植物乳桿菌Halobacterium sp. 兔子組織型纖溶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒
膠孢Burkholderia caryophylli兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒
金龜子綠僵菌Lactobacillus gasseri兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒
多正青霉Lactobacillus casei兔子組(HIS)ELISA試劑盒
Achromobacter insolitus Streptococcus thermophilus兔子組(HIS)ELISA試劑盒
立枯絲核菌Flavobacterium omnivorum兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
雜色曲霉原變種Flavobacterium xinjiangense兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌Flavobacterium xinjiangense兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α) ELISA試劑盒
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體粘金黃菌(不提供)沙門氏菌
L-型電壓依賴型鈣通道α抗體動物乳桿菌埃森沙門氏菌
血管內(nèi)皮生長因子D型抗體簡單類諾卡氏菌馬流產(chǎn)沙門氏菌
極低密度脂蛋白受體抗體成團(tuán)芽球菌湯卜遜沙門氏菌柏林變種
MEK1/2變構(gòu)抑制劑(PD318088)N-甲基吩嗪甲基硫鹽
其他 N-甲基二并吡嗪甲基硫鹽,;吩嗪二甲酯硫鹽;5-甲基吩嗪硫甲酯,;吩嗪硫甲酯,;甲硫吩嗪;硫甲酯吩嗪
英文名稱: PMS
其他英文名稱: Phenazine methosulfate,;N-Methylphenazinium methylsulfate,;N-Methyldibenzopyrazine methyl sulfate salt;5-Methylphenazinium
產(chǎn)品規(guī)格: 高純,,98%
包 裝: 1克/5克/25克
CAS號:299-11-6
C13H11N2.CH3SO4=306.34
級別:High purity grade
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):158~160℃
性狀:黃色至棕色結(jié)晶,。對光不穩(wěn)定。易溶于水,,溶于乙,。有刺激性
用途:生化研究。凝膠電泳中電子載體。組織培養(yǎng)基,。誘變劑
保存:-20℃,,避光