詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500μL | 1~3天 |
商品介紹:
SYTOX 綠色死細胞核酸染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一種可輕易穿過受損細胞質(zhì)膜而不能透過活細胞質(zhì)膜的綠色核酸染料,,其在于核酸結(jié)合之后熒光強度會得到超過500 倍的顯著增強,。SYTOX 綠色死細胞核酸染料可以用于染死的真核細胞的RNA和DNA,在革蘭氏細菌中同樣也適用,。使用者可以利用氬激光激發(fā)器的488nm(或者其他任何帶有450-490nm 激發(fā)光源的激發(fā)器)激發(fā)染料,。 |
SYTOX 綠色死細胞核酸染料可用于多色熒光分析,在不同的實驗應用中染固定細胞的核酸,,如,,熒光顯微鏡、熒光酶標儀,,流式細胞儀上,。
儲存:-20℃,避光,,有效期6個月,。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
扁蓄苷(標準品)英文名稱: Iohexol口蹄疫病A型抗體(N端)包裝25g
表白樺脂(標準品)英文名稱: Maltose Phosphorylase 5U/mg腎刷狀緣抗體包裝500g
表兒茶(標準品)英文名稱: MetribuzinFLAG Tag標簽抗體(N端)包裝5g
表兒茶沒食子酯(標準品)英文名稱: MU-alpha-GALFAM166A蛋白抗體包裝100g
表告依春(標準品)英文名稱: Mucic acid脂肪合成抗體包裝25g
表戈米辛O(標準品)英文名稱: Naphthol AS-MX phosphate腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體(C端)包裝5g
表沒食子兒茶(標準品)英文名稱: Potassium oxalate, monohydrate磷化纖維束蛋白同源物1抗體包裝1g
表沒食子兒茶沒食子酯(標準品)英文名稱: Sodium bitartrate, monohydrate粘著斑激抗體包裝5g
表木栓(標準品)英文名稱: Sodium sulfate, decahydrate凝血因子5抗體包裝100mg
表小檗堿(標準品)英文名稱: Span* 40成纖維生長因子10抗體包裝1g
別隱品堿;A-別隱品堿(標準品)英文名稱: Tyramine hydrochlorideXIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體包裝250mg
濱蒿內(nèi)酯(標準品)英文名稱: 2-Furoic acid羊抗人纖維蛋白原抗體包裝1g
檳榔(標準品)英文名稱: 2-MethylimidazoleFas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝250mg
檳榔花(標準品)英文名稱: 6-ChloropurineF-box蛋白38抗體包裝100g
波棱瓜子(標準品)英文名稱: Big CHAPFK506結(jié)合蛋白38抗體包裝25g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白試劑盒七葉皂苷 IIa;Escin IIa
暗灰鏈霉菌Streptomyces│canus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR嗜性粒陽離子蛋白試劑盒七葉皂苷 Ib;Escin Ib
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品嗜粒趨化蛋白Eotaxin 2試劑盒七葉皂苷 Ia;Escin Ia
死細胞核酸染料-綠菁SYTOX芴甲氧羰基-S-乙酰甲基-L-半胱
其他Na-芴甲氧羰?;?S-(乙?;?甲基)-L-半胱;FMOC-S-乙酰甲基-L-半胱
英文名稱:Nα-Fmoc-S-acetaminomethyl-L-cysteine
其他英文名稱:Fmoc-Cys(Acm)-OH
產(chǎn)品規(guī)格:特純,,98%
包裝:5克/25克/100克
CAS號:86060-81-3
C21H22N2O5S=414.47
級別:Purum
含量:≥98.0%
熔點:145~150℃
性狀:粉末
用途:生化研究
保存:2~8℃