操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:含人PRC2的野生型EZH2抑制劑
英文名稱:EPZ-6438 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg EPZ-6438抑制含人PRC2的野生型EZH2,Ki為2.5±0.5nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1403254-99-8 別名:Tazemetostat;E-7438 純度:99.63% 分子量:572.74 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對較大,,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測,。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
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多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:>98%Corin elisa試劑盒覆盆子
圓錐曲霉Aspergillus│conicus 質(zhì)量規(guī)格:>97%,單氧化(MAO)抑制劑COP9 結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2試劑盒飛蓬酯乙
綠色鏈霉菌Streptomyces│viridis 質(zhì)量規(guī)格:>96.5%,,BSCOLL2-1NO2 elisa試劑盒飛蓬苷
含人PRC2的野生型EZH2抑制劑偶氮胭脂紅B
其他偶氮洋紅B,;偶氮紅B
英文名稱:Azocarmine B
其他英文名稱:Rosinduline 2B;C.I.50090
產(chǎn)品規(guī)格:BS
包裝:10克
CAS號:25360-72-9
C28H17N3Na2O9S3=681.62
級別:BS
熔點(diǎn):≥300℃
λmax:~516 nm (H2O)
性狀:紅棕色粉末,。易溶于吡啶,,溶于水和乙二,極微溶于乙,、乙乙酯,、二甲、,、,、甲和橄欖油。水溶液呈藍(lán)紅色,,加鹽有棕色沉淀,。在濃硫中呈綠色,稀釋后有藍(lán)棕色沉淀,。
用途:生化研究,。生物染色。色譜和電泳中蛋白染色,。
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