培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 利用根據(jù)線蟲在固定時體內(nèi)各器官的氫離子濃度和生理狀態(tài)不同,,可區(qū)分線蟲和植物組織,游離的線蟲經(jīng)過染色后內(nèi)部器官染成不同顏色,,便于觀察識別,,主要用于觀察游離線蟲的染色 注意事項: 主要由次甲藍(lán)、乙醇,、蒸餾水等組成 儲存條件:室溫,,避光,12個月 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
裂褶菌AP-1μ2抗體Human LRRC8C ELISA Kit小鼠胰島樣生長因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒
柱形孢鏈霉菌肥大膜抑制性受體Allergin1抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病腦鈉通道蛋白1抗體Human LSAMP ELISA Kit小鼠胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒
土庫曼野野村氏菌肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit小鼠胰島降解(IDE)免疫試劑盒
黑木耳三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠胰島(INS)免疫試劑盒
黃桿菌甲胎蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit小鼠原激活肽(TAP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌毛細(xì)血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit小鼠-1(trypsin-1)免疫試劑盒
檸檬形克勒克酵母ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白2抗體Human LRRC41 ELISA Kit小鼠(trypsin)免疫試劑盒
球孢白僵菌肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠胰α淀粉(AMY2A)免疫試劑盒
Rhizobium alkalisoli性鈣調(diào)蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒
產(chǎn)腸大腸埃希氏菌磷化CD156b抗體Human LRRC4C ELISA Kit小鼠一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母乙脫氫5抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠一氧化氮(NO)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌乙脫氫6抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠葉(FA)免疫試劑盒
假單胞菌溶血磷脂?;D(zhuǎn)移5抗體Human LRRC18 ELISA Kit小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體Human LRCH3 ELISA Kit小鼠氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫試劑盒
灰樹花G25免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體Human LRRC20 ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒
檸檬球菌Citricoccus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC胞外超氧化物歧化試劑盒3-乙南美楝屬二酯
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR胞漿型磷脂A2-α試劑盒乙酰基二氫美味草A
傘枝犁頭霉Absidia│corymbifera 質(zhì)量規(guī)格:BR包蟲抗體IgG elisa試劑盒羽扇烯
線蟲活體染色液(多色藍(lán)法)曲拉通x-100
其他乳化劑OP-10,;乳化劑TX-10,;OP乳化劑
英文名稱:Triton x-100
其他英文名稱:Polyethylene glycol tert-octylphenyl ether;tert-Octylphenoxy poly(oxyethylene)ethanol,;Octoxinol
產(chǎn)品規(guī)格:CP
包裝:500毫升
產(chǎn)品規(guī)格:試劑級
包裝:500毫升
CAS號:9002-93-1
分子式:t-Oct-C6H4-(OCH2CH2)9-10OH
級別:CP
密度(20℃) :≥0.98g/ml
堿度試驗:合格
霧點:75~85℃
C34H62O11=647
級別 :Reagent Grade
Peroxides:None
pH (5%, Water) @25C:6.0~8.0
性狀:無色或幾乎無色透明粘稠液體,。能溶于水、甲,、二甲和乙,。沸點:270℃;熔點:6℃,;折光率:1.491,。
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度190℃,溶劑為,、,、二氯、甲)分離分析烴類化合物,、含氧化合物(,、酯、),、堿性和中性含氮化合物,、硫。用途廣泛的非離子表面活性劑,,在溫和的變性條件下用于恢復(fù)膜組分
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