培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
高保真KOD試劑盒 |
| 50U/200U/1000U | 1~3天 |
商品介紹:
KOD DNA polymerase 是從克隆有α –型高保真DNA聚合酶的大腸桿菌中分離純化所得,具有3`→5`核酸外切酶活性,,保真性能比普通Taq聚合酶高80倍,。具有較高的延伸速率,在推薦的條件下大于每分鐘2kb,,PCR產(chǎn)物為平端,,可與直接接入本公司Blunt平端連接載體中。用于高保真,、快速擴(kuò)增目標(biāo)DNA,,環(huán)拉法引入點(diǎn)突變,補(bǔ)平DNA粘性末端等,。 |
經(jīng)酶切實(shí)驗(yàn)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶污染,,PCR方法未檢測(cè)到宿主DNA殘留,能夠有效擴(kuò)增大腸桿菌基因組DNA,。
酶活定義:
在推薦的緩沖反應(yīng)體系中,,以大馬哈魚精DNA為模板,68℃,、30min內(nèi)合成10nmol核酸所需要的酶量為一個(gè)活性單位,。
保存條件:
儲(chǔ)存溶液為:50mM Tris-HCl(pH7.6),50mM KCl,,1mM DTT,,0.1mM EDTA,50%(V/V) glycerol,,-20℃存放一年,,無(wú)明顯活性喪失。冰袋運(yùn)輸 。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
二尼柳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Etodolac8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體包裝5g
二甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Etonogestrel8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框76抗體包裝1g
二磺拉帕替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Everolimus;RAD0018號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體包裝250mg
二磺阿米三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluocinolone Acetonide6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框97抗體包裝5g
二氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluocinolone Acetonide補(bǔ)體C7抗體包裝1g
二二氮環(huán)已烷鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupirtine maleate7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框10抗體包裝25g
二二異(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupirtine maleate7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體包裝5g
二十,花生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fulvestrant補(bǔ)體C9b抗體包裝1g
二氧六環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gestodene9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體包裝5g
二乙酰乙乙二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gestodene9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框131抗體包裝1g
二乙酰大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexareline9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框135抗體包裝5g
法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iloperidone8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體包裝1g
法莫替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iloperidone8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體包裝25g
反式(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imipenem monohydrate20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框20抗體包裝5g
泛硫乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imipenem monohydrate4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體包裝100g
靈芝Ganoderma│lucidum 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR,醋鹽形式胸腺非依賴性抗原試劑盒西紅花苷I;CrocinⅠ
人型副球菌Paracoccus│homiensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,用于藥理造模胸腺表達(dá)趨化因子試劑盒辛弗林(94-07-5);Synephr
魚腥藍(lán)細(xì)菌Anabaena│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胸腎表達(dá)趨化因子試劑盒五味子酯乙;Schizandrol B
高保真KOD試劑盒鹽羥胺
其他 氯化羥胺,;氫氯羥胺,;羥基氯化銨;鹽胲,;羥基氯化胺,;羥胺;羥胺鹽
英文名稱: Hydroxylammonium chloride
其他英文名稱: Hydroxylamine hydrochloride,;Oxammonium hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格: AR,,98.5%
包裝:100克
CAS號(hào):5470-11-1
H3NO•HC1=69.49
級(jí)別:AR
含量:≥98.5%
pH(50g/L,25℃):2.5~3.5
澄清度試驗(yàn):合格
銨鹽:≤0.1%
硫鹽:≤0.002%
鐵:≤0.0003%
重金屬:≤0.0003%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.01%
性狀:無(wú)色結(jié)晶,,易受潮并逐漸分解,,能溶于水、,、三,。1g溶于約1ml水(17℃時(shí),,83g溶于100ml水)、19ml乙,、8ml甲,,溶于、甘油和二,。0.2mol/L水溶液pH為3.2,。半數(shù)致死量(小鼠,經(jīng)口)408mg/kg,。有腐蝕性,。密度:1.67;熔點(diǎn):155-157℃
用途:生化研究,。無(wú)機(jī)分析還原劑,,絡(luò)合劑,電分析去極劑,,脂肪和肥皂的抗氧劑,分析甲醛,、樟腦和葡萄糖等,,有機(jī)分析檢驗(yàn)醛和酮類,微量分析磺,,鋼鐵中鎂成分測(cè)定,,有機(jī)合成制備肟類。彩色影體洗印,。催化劑,。溶脹劑。共聚反應(yīng)阻聚劑,。
保存:RT,,注意防潮