培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ALK5抑制劑(GW788388) | GW788388 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
GW788388是一種有效的ALK5抑制劑,,IC50值18nM;同時(shí)抑制TGF-β II型受體和激活素II型受體的活性,,但對(duì)BMP II型受體無(wú)作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):452342-67-5 純度:99.64% 分子量:425.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
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轉(zhuǎn)錄因子Sox3抗體鏈球菌屬人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞
神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒蛋白5抗體格氏乳球菌人腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體乳乳球菌乳脂亞種人角膜成纖維細(xì)胞
跨膜蛋白SEMA4B抗體季也蒙假絲酵母人角膜上皮細(xì)胞
ALK5抑制劑(GW788388)黑色(溶)
其他酒精元;油溶黑5,;溶尼格洛辛,;精元;胺黑,;溶黑,;黑;溶胺黑,;油溶胺黑,;溶黑色
英文名稱:Nigrosine alcohol soluble
其他英文名稱:Nigrosin spirit soluble;Nigrosin B spirit soluble,;Oil soluble black,;C.I. 50415
產(chǎn)品規(guī)格:BS
包裝:25克
CAS號(hào):8005-02-5
級(jí)別:BS
生物染色試驗(yàn):合格
性狀:灰黑色到藍(lán)黑色粉末或塊狀。系由胺,、鹽胺,、硝基和鐵或銅灼燒至180~200℃而得,,或?yàn)橄趸?硝基甲酚)、胺,、鹽胺和鐵灼熱而成的各種組分。易溶于油和硬脂,,溶于,,溶于汽油呈紅紫色,溶于呈藍(lán)紫色,,溶于乙和油脂呈深藍(lán)色,。不溶于水。大吸收波長(zhǎng)565nm,。
用途:生化研究,。生物染色。神經(jīng)組織,、胰組織,、細(xì)胞芽胞等的染色
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