操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:過(guò)氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)
英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:2×10ml|2×20ml 發(fā)貨周期:1~3天 用途: 過(guò)氧化物酶酶染色 注意事項(xiàng): 主要由固定液,、WG-KI溶液等組成,,混合后使用。 儲(chǔ)存條件:室溫,,避光,,12個(gè)月 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療,。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5、最好使用一次性吸頭,、管,、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
商陸皂苷T英文名稱: Esculin磷化肌球蛋白輕鏈抗體包裝5g
商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fraxetin肌肉特異性泛蛋白連接1抗體包裝1g
商陸皂苷辛英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin泛蛋白連接抗體包裝25g
芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5g
芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Solanesol可溶性蘋(píng)果脫氫抗體包裝1g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hesperitin蛋白激C亞性D型抗體包裝1g
蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Qingyangshengenin A磷化µ-型阿片受體抗體包裝5g
蛇膽汁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Qingyangshengenin B磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝1g
射干(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4'-Demethylepipodophyllotoxin基質(zhì)金屬蛋白9抗體包裝250mg
麝香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Demethoxycurcumin染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體包裝1g
伸筋草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Norisoboldine單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體包裝25g
腎茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydrodiisoeugenol線粒體核糖體蛋白L11抗體包裝5g
升麻(興安升麻)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corynoxeine促血管平滑肌分化因子抗體包裝1g
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dehydrocostus Lactone跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體包裝250mg
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Genistin磷化致癌基因C-Myc抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:培養(yǎng)級(jí),,效價(jià)≥180IU/mg抗U1小核核糖核蛋白70kDa試劑盒對(duì)葉百部堿;Tuberostemonin
黃土根瘤菌Rhizobium│plateaum 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,藥用級(jí)抗TNF-α自身抗體elisa試劑盒東莨菪內(nèi)酯;Scopoletin
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,CP抗SS-B/La抗體elisa試劑盒丁香;Syringic acid
過(guò)氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)石蕊
其他石蕊指示劑
英文名稱:Litmus
其他英文名稱:Tournesol;Turnsole,;Laccamusica
產(chǎn)品規(guī)格:IND
包裝:25克
CAS號(hào):1393-92-6
相對(duì)分子質(zhì)量:~3300
級(jí)別:IND
分光光度試驗(yàn):合格
PH :4.5(紅)~8.3(藍(lán))
性狀:藍(lán)色粉末或塊狀,。主要成分為石蕊(AzoliTmus)和紅石蕊精(EryThro-liTmin)的堿金屬化合物。部分溶于水和乙而呈藍(lán)色,。加則溶液變紅,,加過(guò)量堿則溶液又變藍(lán)。
用途:生化研究,。堿指示劑,。制備石蕊試紙。培養(yǎng)基染色,供顯微診斷用
性狀:類(lèi)至淡黃色粉末。溶于甲:10mg/ml,;也溶于DMSO:50mg/ml
用途:生化研究,。化學(xué)發(fā)光試劑
保存:2~8℃,。保質(zhì)期2年