中文名稱(chēng):Caspase-4活性測(cè)定試劑盒
英文名稱(chēng):Caspase-4 Activity colorimetric assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于測(cè)定哺乳動(dòng)物組織,、細(xì)胞caspase-4活性。測(cè)定原理基于Caspase-4特異水解其多肽底物Ac-LEVD-pNA,,釋放出游離的硝基pNA,后者呈黃色在405nm具有大吸收峰,,用可見(jiàn)光分光光度比色方法測(cè)定,。其吸光度值對(duì)應(yīng)于Caspase-4的水解活性。 |
細(xì)胞凋亡屬于程序化細(xì)胞死亡,,可見(jiàn)于各種器官和細(xì)胞,,在正常發(fā)育、生理,、病理過(guò)程中對(duì)細(xì)胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用,。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細(xì)胞凋亡過(guò)程的蛋白酶家族,包含10多個(gè)成員,。Caspase-4可以和Apaf-1相互作用,,并參與細(xì)胞色素導(dǎo)致的Caspase-3激活,也可以和caspase-14相互作用,。
所需儀器:酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板;或可見(jiàn)光分光光度計(jì)配100μl容積的石英比色杯。
工作波長(zhǎng):大吸收波長(zhǎng)405nm,,如不具備也可在400~450nm范圍內(nèi)測(cè)定,。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療,。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5、最好使用一次性吸頭,、管,、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
琥珀舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (S)-Carbidopa腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體包裝25g
琥乙紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chlormadinone Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體包裝5g
花生四烯(AA)英文名稱(chēng): Chlormadinone Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體包裝25g
華蟾它靈;華蟾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ciprofloxacin HCL卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體包裝5g
華法林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ciprofloxacin HCL大腦亮拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g
華法林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cisatracurium besilate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體包裝25g
環(huán)吡司; 環(huán)吡酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cortisone 21-acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體包裝5g
環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cortisone 21-acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5抗體包裝1g
環(huán)扁桃酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dantrolene sodium 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體包裝5g
環(huán);滅蠅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dantrolene sodium 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體包裝1g
環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Calcium Panthotenate(Vitamin B5)周期通道和神經(jīng)分化蛋白1抗體包裝5g
環(huán)磷腺苷,環(huán)腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Desloratadine凝集蛋白家族10抗體(肝)包裝1g
環(huán)戊噻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Desloratadine銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g
磺吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dexamethasone Sodium PhosphateCOMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝1g
磺醋酰鈉 SA-NA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dexamethasone Sodium PhosphateCordon bleu蛋白樣1抗體包裝100ml
微紅帚霉Scopulariopsis│rufulus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6心肌肌球蛋白重鏈試劑盒吳茱萸次堿;Rutaecarpine
空腸彎曲桿菌Campylobacter│jejuni 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品心肌肌凝蛋白輕鏈1試劑盒吳茱萸堿;Evodiamine
新型隱球酵母Cryptococcus│neoformans 質(zhì)量規(guī)格:>95%心肌肌鈣蛋白T試劑盒吳茱萸新堿;Evocarpine
Caspase-4活性測(cè)定試劑盒鹽黃連水合物
其他 鹽小檗堿水合物,;小檗堿鹽鹽水合物
英文名稱(chēng): Berberine chloride hydrate
其他英文名稱(chēng): Natural Yellow 18
產(chǎn)品規(guī)格: BR,,97%
包 裝: 5克/25克/100克
產(chǎn)品規(guī)格: 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
包 裝: 20毫克
CAS號(hào):141433-60-5
C20H18C1NO4•xH2O=371.81 (anhydrous basis)
級(jí)別:BR
含量:≥97.0%(HPLC)
熔點(diǎn):204~206℃
級(jí)別:分析標(biāo)準(zhǔn)品
含量:≥98.0%(HPLC)
性狀:黃色至橙色粉末,。一種生物堿,。
用途:生化研究。用于在肥大細(xì)胞中肝鈉的熒光染色,。一種生物堿,,帶有弱的特性,多重耐藥外排泵(MDR efflux pumps)的底物,。 berberine的抗微生物活性可被MDR抑制劑5-methoxyhydnocarpin (5-MHC)強(qiáng)化,。Berberine調(diào)控肝癌細(xì)胞Pgp基因的表達(dá)
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)