培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
GW0742(GW610742)是一種有效的高度選擇性PPARδ激動(dòng)劑,作用于PPARδ,-α,和-γ受體,,EC50值分別為1nM,1.1μM and2μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):317318-84-6 別名:GW610742 純度:99.63% 分子量:471.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
艱難鏈霉菌蛋白激Aγ抗體Anti-BGLAP Antibodyβ淀粉樣多肽42(ABeta 42)ELISA試劑盒
紅球菌蛋白激受體相關(guān)1β抗體Anti-BEST1 Antibodyβ淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)ELISA試劑盒
大腸埃希菌B淋巴誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體Anti-BEST1 Antibodyβ淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌磷化酪磷α抗體Anti-BGLAP Antibodyβ淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒
尾孢屬蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體Anti-BGLAP Antibodyβ淀粉樣蛋白(Aβ)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷化酪磷α抗體Anti-BGLAP Antibody(PB0074)β-促脂(β-LPH)ELISA試劑盒
小鏈霉菌(小諾卡氏菌)PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體Anti-BID Antibodyβ半乳糖苷(β-GAL)ELISA試劑盒
總狀橫梗霉磷脂磷水解1抗體Anti-BID Antibodyβ半乳糖苷(βGAL)ELISA試劑盒
蘇云金芽胞桿菌抑癌基因p16/p14/P19抗體Anti-BID Antibodyβ基己糖苷A(β-Hex A)ELISA試劑盒
黑木耳蛋白酪磷H1抗體Anti-BID Antibodyβ4整合(ITG β4/CD104)ELISA試劑盒
阿布拉鏈霉菌除瘟變種磷化磷脂酰肌激催化亞單位D抗體Anti-BID Antibodyβ2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)ELISA試劑盒
錳氧化褐黃海水菌磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體Anti-BIRC3 Antibodyβ2整合(ITG β2/CD11+CD18)ELISA試劑盒
單孢哈薩克斯坦酵母穿孔抗體Anti-BIK Antibody(PB0802)β2微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒
芽孢桿菌PALM3抗體Anti-BID Antibody(PB0015)β2微球蛋白(MGβ2)ELISA試劑盒
無花果奇異球菌芳香酯1(對(duì)氧磷)抗體Anti-BIRC2 Antibodyβ2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒
蕓薹鏈格孢(可訂)磷吡哆氧化抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA試劑盒
海泥鼠尾菌Muricauda│lutimaris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
苛求芽孢桿菌Bacillus│fasridiosus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
耶羅威亞解脂酵母Yarrowia│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
高度PPARδ激動(dòng)劑(GW0742)甲基異基甲
其他 3-甲基-2-丁,;3-甲基?。?,,1-二甲基;甲基異基,;異基甲基甲;3-甲-2-丁
英文名稱: MIPK
其他英文名稱: 3-Methyl-2-butanone,;Isopropyl methyl ketone,;Methyl isopropyl ketone
產(chǎn)品規(guī)格: BR,,99%
包 裝: 250毫升
CAS號(hào):563-80-4
C5H10O=86.13
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%(GC)
相對(duì)密度:0.802~0.807
折光率:1.386~1.389
性狀:無色液體。有氣味,。易溶于乙,,極微溶于水。易燃,。中等毒,,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)148mg/kg,。有刺激性,。熔點(diǎn):92℃;沸點(diǎn):94-95℃,;閃點(diǎn):-3℃
用途:生化研究,。溶劑,。有機(jī)合成。塑料工業(yè)
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