培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Akt2抑制劑(CCT128930) | CCT128930 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
CCT128930是一種有效的選擇性Akt2抑制劑(IC50為6nM),比作用于PKA激酶(IC50為168nM)選擇性高28倍,比作用于p70S6K(IC50為120nM)選擇性高20倍,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):885499-61-6 純度:99.71% 分子量:341.84 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
鏈霉菌大鼠抑制AAnti-RAD51D Antibody人乙呋(AD)ELISA試劑盒
孟氏假單胞菌小鼠疊氮胸苷Anti-RAD51B Antibody人乙呋(AD)ELISA試劑盒
綠粘帚霉人原激活肽Anti-RALGAPA2 Antibody人唾液(SA)ELISA試劑盒
黑曲霉人α1性糖蛋白Anti-RAD52 Antibody人唾液(SA)ELISA試劑盒
短波單胞菌小鼠β葡糖苷Anti-RAD54B Antibody人鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒
地衣芽孢桿菌大鼠絨毛膜促性腺激βAnti-RAD54L Antibody人鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒
土壤成對桿菌大鼠性激結(jié)合球蛋白Anti-RALY Antibody人尿游離皮質(zhì)(UFC)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌小鼠多巴Anti-RANBP17 Antibody人尿游離皮質(zhì)(UFC)ELISA試劑盒
冷桿菌屬人內(nèi)皮型一氧化氮合成3Anti-RANBP6 Antibody人硫軟骨(CS)ELISA試劑盒
葡萄座腔菌人二Anti-RANBP6 Antibody人硫軟骨(CS)ELISA試劑盒
玉米大斑小鼠高靈敏度促甲狀腺激Anti-RANBP17 Antibody人硫皮膚(DS)ELISA試劑盒
鮑魚側(cè)耳大鼠脫氫表雄S7Anti-RALY Antibody人硫皮膚(DS)ELISA試劑盒
農(nóng)藥殘留速測儀(農(nóng)卡)大鼠脫氫表雄Anti-RAP2A Antibody人硫類肝(HS)ELISA試劑盒
香菇人胰淀Anti-RAP2C Antibody人硫類肝(HS)ELISA試劑盒
腐皮鐮孢小鼠高敏甲狀腺Anti-RAP1GAP Antibody人硫角質(zhì)(KS)ELISA試劑盒
丁香暗黃鏈霉菌人血管活性腸肽Anti-RAP2B Antibody人硫角質(zhì)(KS)ELISA試劑盒
微管蛋白β輔助因子D抗體冬蟲夏草(斜面)CP70人卵巢癌細(xì)胞
結(jié)構(gòu)蛋白家族2抗體樺褐孔菌(斜面)人乳頭狀肺腺癌細(xì)胞
先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體茄病鐮刀菌(斜面)小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
瞬時(shí)受體電位蛋白12抗體小麥褐斑長蠕孢霉(不提供)小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
Akt2抑制劑(CCT128930)烯葡聚糖凝膠S-400 HR
英文名稱:Sephacryl S-400 High resolution
產(chǎn)品規(guī)格:BR
包裝:150毫升
CAS號(hào):65546-95-4
級別:BR
Useful fractionation range(MW):globular proteins 2×104~8×106;dextrans 1×104~2×106
DNA exlusion limit(base pairs):271
Bead form:Spherical,diameter 25-75um in wet form
Bead structure:Allyl dextran and N,N-methylene bisacrylamide
pH stability:long term 3~11,short term 2~13
Chemical stability:Stable to all commonly used fuffers:0.2M NaOH,;0.1M HC1,;1M acetic acid;8M urea,;6M guanidine HC1,;1% SDS;2M NaC1,;24% ethanol,;30% propanol,;30% acetonitrile(tested at 40℃ for 7 days)
Physical stability:Negligible volume variation due to changes in pH or ionic strength
性狀:含20%乙,底部為膠體,。
用途:生化研究,。For size exclusion chromatography; the HR grade is a smaller particle size with narrower size range distribution, allowing for more efficient separations at faster flow rates. Recommended fractionation ranges are listed for globular proteins and dextrans
保存:2~8℃