培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
USP7-IN-1是新型USP7選擇可逆性小分子抑制劑,,IC50值為33uM,,對USP5、USP8,、Uch-L1,、Uch-L和Caspase的抑制劑弱或無(IC50>200uM),對HCT116細(xì)胞GI50值為67uM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1381291-36-6 純度:99.77% 分子量:425.91 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒
黑曲霉Pseudomonas fluorescens大鼠環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒
桿狀毛霉Pseudomonas fluorescens大鼠環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒
波氏假性阿利什霉Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒
三葉草根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒
洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒
金福菇Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒
壁芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種Pseudomonas fluorescens大鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒
裂褶菌Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
草木樨中華根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
平菇(PL185)Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
沃氏富鹽菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
油菜假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
早老蛋白-1抗體苜蓿莖點霉超氧化物歧化(SOD)分型測試盒(羥胺法)
突觸后密度蛋白95抗體污黑腐皮殼總超氧化物歧化(T-SOD)比色法測試盒(羥胺法)
一種腫瘤抑制基因抗體N端禾谷鐮孢菌谷胱甘肽還原(GR)比色法測試盒
甲狀旁腺激相關(guān)蛋白抗體三隔鐮刀菌總超氧化物歧化(SOD)比色法測試盒(WST-1 法)
USP7小分子抑制劑(USP7-IN-1)α-甲基-D-甘露糖苷
其他甲基-α-D-吡喃甘露糖苷
英文名稱:Methyl α-D-mannopyranoside
其他英文名稱:α-Methyl D-mannoside
產(chǎn)品規(guī)格:超純,99%
包裝:5克/25克/100克/500克
CAS號:617-04-9
C7H14O6=194.18
級別:Ultra pure grade
含量:≥99.0%
比旋光度:+79±2°(c=10% in H2O)
性狀:淺黃色粉末,,熔點102℃,,比旋光度-105o(C=0.25 water,,25℃),略溶于水(2.5% solution 1:1 acetone:water),,溶于吡啶
用途:生化研究,。大腸埃希氏菌的快速測定
保存:-20℃