培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
b-AP15特異性抑制去泛素化酶(deubiquitinating)UCHL5和Usp14活性,。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:1009817-63-3 別名:NSC 687852 純度:98.03% 分子量:419.39 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
意外片球菌線粒體導(dǎo)肽水解β抗體Anti-ADAM10 Antibody抵抗(Resistin)ELISA試劑盒
匍匐曲霉原變種富含脯蛋白15抗體Anti-ADAM19 Antibody低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒
香菇維生K依賴的蛋白C輕鏈抗體Anti-ADAM15 Antibody低氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2)ELISA試劑盒
雪白根霉Anti-ADAM2 Antibody低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
柯達(dá)酵母屬一種腫瘤抑制基因抗體(C端)Anti-ADAM2 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)ELISA試劑盒
紫杉木齒菌血小板活化因子受體抗體Anti-ADAM28 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)ELISA試劑盒
pet-21a蛋白磷γ1抗體Anti-ADAM8 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)ELISA試劑盒
立枯絲核菌核苷還原M2B抗體Anti-ADAMTS1 Antibody低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)ELISA試劑盒
溶血葡萄球菌磷二酯4A抗體Anti-ADAMTS1 Antibody低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA試劑盒
釀酒酵母絲束蛋白T Plastin抗體Anti-ADAM9 Antibody低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
鏈格孢屬神經(jīng)叢蛋白A2抗體Anti-ADAMTS2 Antibody低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒
ATCC 35030網(wǎng)蛋白抗體Anti-ADAMTS2 Antibody低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)ELISA試劑盒
釀酒酵母前列腺腫瘤高表達(dá)蛋白1抗體Anti-ADAMTS13 Antibody低分子肝(LMWH)ELISA試劑盒
球黑孢菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-ADAMTS4 Antibody登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)ELISA試劑盒
盤長孢狀盤孢嘌呤ATP受體抗體Anti-ADAR Antibody登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒
沙漠類芽胞桿菌磷化絲裂原活化蛋白激p38抗體Anti-ADH1A Antibody刀豆A(ConA)ELISA試劑盒
盤長孢狀刺盤孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:98%,美國進(jìn)口
麥芽糖假絲酵母Candida│maltosa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
谷棒桿菌Ⅰ型Corynebacterium│glutamicum Ⅰ 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)堿性藍(lán)26
其他維多利亞藍(lán)B,;堿性品藍(lán)B,;堿性艷藍(lán)B;鹽基品藍(lán)B,;維多利亞蘭B,;品藍(lán)B;勝利藍(lán)B
英文名稱:Basic Blue 26
其他英文名稱:[4-[[4-Anilino-1-naphthyl][4-(dimethylamino)phenyl]methylene]cyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]dimethylammonium chloride,;Victoria Blue B,;C.I. 44045
產(chǎn)品規(guī)格:IND,80%
包裝:25克
CAS號:2580-56-5
C33H32ClN3=506.09
級別:IND
含量:≥80%
Lambda Max:599~605nm in ethanol
干燥失重:≤5.0%
性狀:青銅色發(fā)光顆?;蜃瞎夥勰?。溶于熱水呈藍(lán)色,溶于乙為純藍(lán)色,微溶于冷水,。熔點 206℃(分解),。大吸收波長 599nm
性狀:紅棕色粉末。溶于稀堿溶液呈紅紫色,,微溶于沸乙,、、乙和甲,,均呈黃色,,幾乎不溶于水。熔點199~200℃,。有刺激性
用途:生化研究,。鎂和鉬的測定。吸附指示劑
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