培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
PF-670462是CK1ε的選擇性抑制劑,IC50為7.7nM,,比對其它42種激酶的抑制性高30倍以上。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:950912-80-8 純度:99.28% 分子量:410.32 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
凍土毛霉小鼠顆粒BAnti-PRPF18 Antibody人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒
谷棒桿菌人幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgGAnti-PROCR Antibody人白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒
茄病鐮刀菌大鼠P53Anti-PRPF31 Antibody人C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒
氏菌人粘蛋白/粘液7Anti-PRPF19 Antibody人C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒
美澳型核果褐腐病菌大鼠環(huán)磷鳥苷Anti-PRPF39 Antibody人假定蛋白LOC677168 ELISA試劑盒
總狀共頭霉小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1Anti-PRPF39 Antibody人假定蛋白LOC677168 ELISA試劑盒
擬莖點(diǎn)霉大鼠一氧化氮合成Anti-PRPH Antibody人淋巴抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒
Pantoea eucalypti大鼠Y-谷酰轉(zhuǎn)肽Anti-PRPF38A Antibody人淋巴抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒
傘枝梨頭霉小鼠顆粒AAnti-PRSS1 Antibody人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒
淡青鏈霉菌小鼠淋巴趨化因子Anti-PRSS33 Antibody人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒
詹氏桿菌人Ⅰ型前膠原N端前肽Anti-PRSS3 Antibody人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒
黑木耳大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成Anti-PRPH Antibody人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒
大腸埃希菌大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成Anti-PSG1 Antibody人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒
貝葉多孔菌人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Anti-PSEN1 Antibody人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒
馬賽菌小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-PSKH1 Antibody人類似cDNA順序BC027382 ELISA試劑盒
蠟狀芽孢桿菌小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9Anti-PSMD11 Antibody人類似cDNA順序BC027382 ELISA試劑盒
味覺受體蛋白家族2亞基7抗體叢片韌革菌TE-9 人食管癌細(xì)胞
味覺受體蛋白家族2亞基50抗體李木層孔菌人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
跨膜蛋白59抗體翹鱗傘膽管上皮癌細(xì)胞
TATA結(jié)合蛋白TBP抗體古巴光蓋傘小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾)
CK1ε抑制劑(PF-670462)草鈉
英文名稱: Sodium oxamate
其他英文名稱: Aminooxoacetic acid sodium salt,;Oxalic acid monoamide sodium salt,;Oxamic acid sodium salt
產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%
包 裝: 5克/25克
CAS號:565-73-1
C2H2NNaO3=111.03
級別:High purity grade
含量:≥98.0 %
氯化物:≤0.01%
硫鹽:≤0.01%
重金屬:≤10ppm
性狀:粉末,。溶于水,熔點(diǎn)300℃
用途:生化研究,。
保存:RT,。保質(zhì)期5年