操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3,、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜。
6,、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:FGFR1酪氨酸激酶抑制劑(PD-166866)
英文名稱:PD-166866 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 PD166866是選擇性的FGFR1酪氨酸激酶抑制劑,IC50值為52.4nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):192705-79-6 純度:99.68% 分子量:396.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
蘋(píng)果鏈格孢Enterobacter sp.
巨大芽孢桿菌Clostridium sporogenes
米黑根毛霉Frateuria aurantia
耐冷冷桿菌Frateuria aurantia
火雞皰疹病(+)陽(yáng)性血清X(qián)anthomonas campestris
構(gòu)巢裸胞殼Clostridium succinegenum
解脂假絲酵母解脂變種Clostridium thermocellum
弗雷德里克斯堡假單胞菌Haloarcula marismortui
奶酪發(fā)酵小短桿菌Alcaligenes faecalis subsp. faecalis
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢Brevundimonas vesicularis
大腸埃希菌Stenotrophomonas maltophilia
擬層孔菌Enterobacter sp.
巴貝斯蟲(chóng)(青海剛察株)Brevundimonas diminuta
枯草芽孢桿菌Enterobacter sp.
爪哇根霉Achromobacter denitrificans
季也蒙假絲酵母Alcaligenes faecalis subsp. faecalis
豬睪(T)免疫試劑盒ATPIF1蛋白抗體人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒桐堿
豬高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒Attractin蛋白抗體人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒五加苷E
豬高爾基蛋白73(GP-73)免疫試劑盒磷化有絲分裂激B抗體人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒五加皂苷B
豬肝炎病的受體1/腎損傷分子1/KIM1(HAVCR1)免疫試劑盒肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒楤木皂苷A
FGFR1酪氨酸激酶抑制劑(PD-166866)D-葡萄糖-6-磷二鈉鹽
其他6-磷葡萄糖二鈉鹽,;6-磷葡萄糖二鈉鹽
英文名稱:G-6-P-Na2
其他英文名稱:D-Glucose-6-phosphate disodium salt;Robison ester
產(chǎn)品規(guī)格:高純,,98%
包裝:1克/5克
CAS號(hào):3671-99-6
C6H11Na2O9P•xH2O=304.10 (anhydrous basis)
級(jí)別:High purity grade
含量:≥98.0%
葡萄糖glucose:≤0.2%
性狀:粉末
性狀:結(jié)晶性粉末,,易溶于水
用途:生化研究。底物,,用于測(cè)定葡萄糖-6-磷脫氫
保存:2~8℃