培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 肥大細胞脫顆粒染色 注意事項: 肥大細胞呈紫色至深紫色,,彈力纖維呈紫色,紅細胞呈橙黃色,,其余組織呈淡黃色,,其他細胞多不著色。
|
儲存條件:4℃,,避光,,12個月
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
桑辛;桑根皮(標準品)英文名稱: Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)胰高血糖樣肽2受體抗體包裝1g
桑葉(標準品)英文名稱: N-Methyliminodiacetic Acid生長休止特定蛋白1抗體包裝5g
桑枝(標準品)英文名稱: Nitrilotriacetic Acid Disodium Saltγ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈1抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯英文名稱: N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acidγ1基丁受體α5/GABRα5抗體包裝5g
沙棘(標準品)英文名稱: Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic AcidG蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝200mg
沙棘膏(標準品)英文名稱: TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體包裝100g
沙苑子(標準品)英文名稱: Dimethylsulfonazo IIIG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝25g
沙苑子苷(標準品)英文名稱: Sulfonazo III 糖基轉(zhuǎn)移GLT8D2抗體包裝500g
沙苑子苷A(標準品)英文名稱: 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate高爾基體外周膜蛋白p65抗體包裝100g
砂仁(陽春砂)(標準品)英文名稱: 2,2'-Dihydroxyazobenzene核因子GCNF/維受體相關(guān)受體抗體包裝500g
山茶甙A英文名稱: StilbazoG蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體包裝5g
山茶甙B英文名稱: Lumogallion 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝100mg
山茶苷A英文名稱: Disodium Bathocuproinedisulfonate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝500mg
山豆根(標準品)英文名稱: Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝1g
山風(標準品)英文名稱: Bathocuproine (purified by sublimation)轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%腦腸肽試劑盒3-O-咖啡??鼘?3-O-caffe
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品囊蟲病抗體試劑盒輪環(huán)藤寧;Cyclen
靈芝(赤芝,,紅靈芝)Ganoderma│lucidium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31難辨梭狀芽孢桿菌B試劑盒龍膽山酚;Bellidifolin
肥大細胞染色液(醛品紅-橙黃G法)兔肌動蛋白
英文名稱:Actin from rabbit muscle
產(chǎn)品規(guī)格:BR,85%
包裝:1毫克/5毫克/25毫克
CAS號:51005-14-2
分子量:43 kDa
含量:≥85% (SDS-PAGE)
蛋白含量:≥80%(biuret)
性狀:普遍存在于各類細胞的細胞核中,。肌肉結(jié)構(gòu)蛋白的一種,,肌原纖維細絲中的主要成分。它是由一條多肽鏈組成,。分子構(gòu)型呈球形,,有方向性,一般稱球狀肌動蛋白(G-肌動蛋白),;當增加溶液的離子強度,,在Mg2+存在下,許多個(300~400)G-肌動蛋白按同一前后方向聚合成長鏈,,稱為纖維狀-肌動蛋白(F-肌動蛋白),。在肌原纖維細絲中,以兩條F-肌動蛋白鏈相互盤繞成雙股螺旋
用途:生化研究,。肌動蛋白,、肌動蛋白結(jié)合蛋白和肌動蛋白相關(guān)蛋白等蛋白共同參與了細胞核內(nèi)肌動蛋白形式和功能的調(diào)節(jié),包括肌動蛋白單體與聚合形式的轉(zhuǎn)換,、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)調(diào)整,、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、mRNA加工和運輸?shù)仍S多重要生理功能,。
保存:2~8℃