操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:不可逆抑制劑(Pentostatin)
英文名稱:Pentostatin 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg Pentostatin是一種高效的adenosine deaminase的不可逆抑制劑,,Ki值為2.5pM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號(hào):53910-25-1 別名:Deoxycoformycin 純度:99.77% 分子量:268.27 儲(chǔ)存條件:-20℃,,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用,。 |
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
細(xì)枝孢甘脫羧P蛋白抗體Human THRSP ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒
耐輻射奇球菌核孔蛋白GLE1抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒
交替紅色桿菌屬腎小球上皮蛋白1抗體Human THTPA ELISA Kit大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
柱孢菌屬轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體Human THUMPD3 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
小棱盤(pán)菌麥角蛋白抗體Human TICAM2 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體Human TIGD5 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
溶淀粉類芽孢桿菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移1抗體Human THUMPD1 ELISA Kit大鼠絡(luò)(TYR)免疫試劑盒
油菜菌核病菌谷酰酰水解抗體Human TIGD1 ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒
乳白耙菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體Human TIMELESS(Protein timeless homolog) ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒
大腸埃希菌糖基轉(zhuǎn)移28家族1抗體Human THOC7 ELISA Kit大鼠卵泡抑(FS)免疫試劑盒
東方伊薩酵母糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體Human TIMM10 ELISA Kit大鼠卵磷脂膽固?;D(zhuǎn)移(LCAT)免疫試劑盒
貝酵母膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體Human THOC6 ELISA Kit大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)免疫試劑盒
黑曲霉磷化糖皮質(zhì)激受體抗體Human THRAP3 ELISA Kit大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒
香菇葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Human Thrombospondin 3 ELISA Kit大鼠硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒
明尼蘇達(dá)被毛孢糖皮質(zhì)激受體β抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠硫類肝(HS)免疫試劑盒
武夷小單孢菌胰島葡萄糖6磷2抗體Human TINP1 ELISA Kit大鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)芳樟
施氏微桿菌Microbacterium│schleiferi 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用蓮心堿
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,,200-400目蓮心堿高鹽
不可逆抑制劑(Pentostatin)磷氫鈉銨
其他 磷鈉銨;磷氫銨鈉,;磷銨鈉
英文名稱: Microcosmic salt tetrahydrate
其他英文名稱: Sodium ammonium hydrogen phosphate tetrahydrate,;Sodium ammonium phosphate tetrahydrate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
包 裝: 500克
CAS號(hào):7783-13-3
NaNH4HPO4•4H2O=209.07
級(jí)別:AR
含量:≥98.0%
水溶解試驗(yàn):合格
氯化物:≤0.003%
硫鹽:≤0.02%
硝鹽:≤0.001%
重金屬(以Pb計(jì)):≤0.001%
鎂:≤0.001%
鐵:≤0.001%
砷:≤0.001%
水不溶物:≤0.005%
澄清度試驗(yàn):≤4號(hào)
性狀:無(wú)色單斜結(jié)晶或 顆粒,。無(wú)氣味,。在空氣中風(fēng)化并失去部分。長(zhǎng)時(shí)間加熱后逸去水和成為偏磷鈉(NaPO3),。溶于5份冷水,1份沸水,幾乎不溶于乙,。5%水溶液pH 7.8~8.2。相對(duì)密度 1.544,。熔點(diǎn)約80℃(急熱),。
用途:生化研究,。測(cè)定鎂和鋅。吹管分析(磷 鹽球試驗(yàn)),。鈾溶液標(biāo)定,。配制磷銨和鉬銨貯備液。
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