操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:STAT5抑制劑(STAT5-IN-1)
英文名稱:STAT5-IN-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 STAT5-IN-1是STAT5的抑制劑,,對STAT5β亞型的IC50值為47μM。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:285986-31-4 純度:98.0% 分子量:293.28 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
注意事項:
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
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維甲誘導(dǎo)蛋白1抗體白腐盾殼霉人卵巢癌細(xì)胞
轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4抗體三骨菇人急性淋白血病細(xì)胞
Rab溶體相互作用蛋白樣2抗體高盧蜜環(huán)菌小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激分泌激)
STAT5抑制劑(STAT5-IN-1)氮尿苷
其他 氮雜尿苷;6-氮雜尿苷
英文名稱: 6-Azauridine
其他英文名稱: 6-Azauracil riboside,;2-β-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazine-3,5(2H,4H)-dione
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包 裝: 1克/5克
CAS號:54-25-1
C8H11N3O6=245.19
級別:BR
熔點:157~159℃
性狀:結(jié)晶,。由6-氯雜尿嘧啶(6-azauracil)通過大腸桿菌轉(zhuǎn)化,也可用化學(xué)合成法制得,。
用途:生化研究,。在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為6-氮雜尿苷,,,抑制乳清核苷脫羧,,阻止乳清核苷轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜍眨瑥亩种艱NA合成,。
保存:2~8℃