詳細介紹
商品介紹:
TC-DAPK6是一種有效的ATP競爭性的選擇性DAPK抑制劑,,作用于DAPK1和DAPK3,,IC50分別為69和225nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:315694-89-4 別名:DAPK inhibitor 純度:95.0% 分子量:276.29 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用,。 |
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
TC-DAPK 6 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測,。
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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DAPK抑制劑(TC-DAPK 6)硅藻土載體
其他 硅藻土545,;助濾劑545,;助熔瀝青;硅藻土擔體G
英文名稱: Celite 545
其他英文名稱: Filter agent
產品規(guī)格: BR
包 裝: 500克/2.5公斤
CAS號:68855-54-9
級別:BR
密度(20℃):≤0.380g/ml
二氧化硅:≥85.0%
顆粒度:合格
灼燒殘渣:≤1.0%
干燥失量:≤1.0%
氧化鋁:≤3.0%
氧化鐵:≤2.0%
性狀:粉末,。系在天然硅藻土內加入助熔劑碳鈉,,在900℃以上煅燒而成的硅藻土載體。純度較高,,惰性,,均勻,催化吸附性能中等,。比表面積 1.0~3.5m2/g,。平均孔徑 9μm。自由下降密度 0.21~0.27g/ml,。顆粒范圍 40~60目,、60~80目、80~100目,、100~120目,。
用途:生化研究,。氣相色譜載體(高使用溫度500℃)。
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