詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Nampt-IN-1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
LSN3154567是一種新型NAMPT抑制劑,作用于NCI-H1155,Calu-6,HCC1937,和MCF-7細胞,IC50值分別為18nM,49nM,333nM,和389nM,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1698878-14-6 純度:98.99% 分子量:419.49 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
哈茨木霉Bacillus subtilis subsp. subtilis植物維生B12(VB12)ELISA試劑盒
科赫芽胞桿菌Paenibacillus polymyxa植物維生A(VA)ELISA試劑盒
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疣梗青霉Geobacillus stearothermophilus植物維生E(VE)ELISA試劑盒
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大豆慢生根瘤菌Bacillus coagulans植物維生D(VD)ELISA試劑盒
栗褐鏈霉菌Paenibacillus macerans植物維生B6(VB6)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌Paenibacillus macerans植物維生B6(VB6)ELISA試劑盒
北京棒桿菌Paenibacillus macerans植物25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
大腸埃希菌Paenibacillus macerans植物25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
列氏糖霉菌Paenibacillus macerans植物維生C(VC)ELISA試劑盒
陰離子轉運蛋白-1抗體漢氏葡糖醋桿菌馬爾他布魯氏菌
糖皮質激調節(jié)激1抗體羅氏乳桿菌綿羊附睪種布魯氏菌
泛連接Siah2斑點氣單胞菌豚鼠亞種豬布魯氏菌
核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體阿普利亞小單孢菌豬布魯氏菌 生物Ⅱ型
NAMPT抑制劑(Nampt-IN-1)L-組鹽鹽一水物
其他鹽組,;L-氫氯組一水物
英文名稱:H-His-OH.HCl
其他英文名稱:L-α-Amino-β-(4-imidazolyl)propionic acid monohydrochloride;L-Histidine Hydrochloride Monohydrate,;L-Histidine monohydrate monohydrochloride
產品規(guī)格:BR,99%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:5934-29-2
C6H9N3O2•HCl•H2O=209.63
級別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+8.5o~+10.5o
鉛:≤5ppm
干燥失重:≤0.30%
灼燒殘渣:≤0.10%
性狀:結晶或結晶性粉末,,無臭,稍苦味,。易溶于甲,,溶于水,不溶于乙
用途:生化研究,。組織胺(histamine)的前體物質,,依靠組脫羧(histidine decarboxylase)
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