商品介紹:
用途:
又稱非特異性酯酶染色液,,可用于血液,、骨髓或細(xì)胞涂片,、冰凍切片的非特異性酯酶染色,,亦可作抑制試驗(yàn)
注意事項(xiàng):
其原理是細(xì)胞中的非特異性酯酶將α-乙酸萘酚水解產(chǎn)生α-萘酚,,α-萘酚再與重氮鹽偶聯(lián),,生成不溶性有色沉淀,,定位于細(xì)胞質(zhì)。
儲(chǔ)存條件:4℃,,避光,,6個(gè)月
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí),;
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
化矢車菊,花青(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2’-OMe Cytidine肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體包裝5g
化纈草英文名稱: ibu-rG珠蛋白1抗體包裝1g
化血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bz-rC間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體包裝25g
輪環(huán)藤根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bz-rAG蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體包裝5g
羅布麻寧,;香草乙,;夾竹桃麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ac-dC黑色瘤相關(guān)抗原11抗體包裝1g
羅布麻葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ibu-dGG蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體包裝25g
羅漢果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: bz-dC麥芽糖結(jié)合蛋白抗體包裝5g
羅漢果苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: bz-dA肌球蛋白XVIIIb抗體包裝1g
羅漢果苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trt-rUMAL蛋白抗體包裝5g
羅漢果黃英文名稱: Trt-dU麥芽糖孔蛋白抗體包裝100g
羅漢果皂苷Iva英文名稱: Trt-dT蕈堿樣蛋白3抗體包裝25g
羅漢果皂苷Ive(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DMT-5-I-dU巨噬清道夫受體1抗體包裝5g
羅漢果皂苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DMT-2'-F-dU牛結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體包裝1g
羅漢果皂苷ⅡA2英文名稱: DMT-2'-OMe-UT淋巴成熟相關(guān)蛋白抗體包裝25g
羅漢果皂苷ⅢA1英文名稱: 5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC黑色瘤相關(guān)抗原D1抗體包裝5g
中間根瘤菌Mesorhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),進(jìn)口原裝抗連接IgG抗體elisa試劑盒鵝去氧膽;Chenodeoxychol
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,sigma分裝抗利尿激V2受體/精加壓受體2試劑盒3,7-O-二咖啡酰奎寧;
寡養(yǎng)單胞菌Stenotrophomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥98%抗利尿激/血管加壓/精加壓試劑盒3,6-O-二咖啡??鼘?
α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)水楊酰胺
其他 2-羥基甲酰胺,;2-羥基芐胺;鄰羥基酰胺,;鄰羥甲酰胺,;柳酰胺
英文名稱: Salicylamide
其他英文名稱: o-Hydroxybenzamide;Salamide,;Samide
產(chǎn)品規(guī)格: CP,,98%
包裝:250克
CAS號(hào):65-45-2
C7H7NO2=137.14
級(jí)別:CP
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):138℃~142℃(2℃)
干燥失重:≤0.3%
硫鹽:≤0.02%
碳鈉溶液溶解試驗(yàn):合格
易炭化物質(zhì):合格
重金屬:≤0.002%
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%
性狀:或淺粉紅色結(jié)晶性粉末。有時(shí)微有苦味,。水中溶解度30℃時(shí)為0.2%,47℃時(shí)為0.8%,、 甘油中溶解度5℃時(shí)為2.0%,39℃時(shí)為5.0%,60℃時(shí)為10.0%、 二中溶解度5℃時(shí)為10.0%,。溶于熱水,、乙和,微溶于冷水。28℃飽和水溶液的pH約為5,水溶性鈉鹽的pH為9,。有毒,,半數(shù)致死量(小鼠,經(jīng)口)1.4g/kg,。有刺激性
用途:生化研究,。防腐。
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