培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,,不要用紗布,;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片),;
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時,;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中,;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
英文名稱:AMG 232 產(chǎn)品規(guī)格:2mg|5mg|10mg|50mg|100mg AMG232是一種有效的p53-MDM2相互作用抑制劑,,在SJSA-1細(xì)胞中,IC50值為9.1nM,。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1352066-68-2 純度:99.73% 分子量:568.55 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
異常威克漢姆酵母磷化絲裂原活化蛋白激ERK抗體Human JUN(Transcription factor AP-1) ELISA Kit犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒
石面單胞菌屬CD312抗體Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)免疫試劑盒
野野村氏菌屬eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human COQ3 (Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase, mitochondrial) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
谷棒桿菌磷化表皮生長因子受體抗體Human RBBP4 (Histone-binding protein RBBP4) ELISA KIT犬血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)免疫試劑盒
堆肥鞘桿菌磷化表皮生長因子受體抗體Human HN1L (Hematological and neurological expressed 1-like protein) ELISA KIT犬血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒
堅強(qiáng)芽孢桿菌肝配蛋白A1受體抗體Human OTX1 (Homeobox protein OTX1) ELISA KIT犬血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒
根瘤菌真核翻譯起始因子2C2抗體Human HCST (Hematopoietic cell signal transducer) ELISA KIT犬血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體Human HORMAD2 (HORMA domain-containing protein 2) ELISA KIT犬血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌EYA4蛋白抗體Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體Human GADD45G (Growth arrest and DNA damage-inducible protein GADD45 gamma) ELISA KIT犬胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒
紫孢側(cè)耳(美味側(cè)耳)吞噬運(yùn)動蛋白2抗體Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit犬胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌紅膜條帶4.1蛋白抗體Human HARBI1 (Putative nuclease HARBI1) ELISA KIT犬心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒
pQE31磷化紅生成受體抗體Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) ELISA KIT犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
毛殼轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體Human HAND1 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 1) ELISA KIT犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
小鼠小短桿菌膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白4抗體Human HAND2 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 2) ELISA KIT犬纖溶原激活物抑制劑1(SERPINE1)免疫試劑盒
巴斯德畢赤酵母erbB3結(jié)合蛋白1抗體Human GRTP1 (Growth hormone-regulated TBC protein 1) ELISA KIT犬細(xì)小病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒
腸膜狀明串珠菌Leuconostoc│mesenteroides 質(zhì)量規(guī)格:鹽野靛堿
皺紋假單胞菌Pseudomonas│corrugata 質(zhì)量規(guī)格:濕楊芽黃
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:干鴉膽子D
p53-MDM2相互作用抑制劑(AMG 232)氯化銫
英文名稱:CSCl
其他英文名稱:Cesium Chloride,;Caesium chloride
產(chǎn)品規(guī)格:生物技術(shù)級,99.5%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:7647-17-8
CSCl=168.36
級別:Biotechnology Grade
Assay:≥99.5%
Abs.@260nm (50%, Water):≤0.1
Potassium:≤0.05%
Nickel:≤0.0001%
Magnesium:≤0.0001%
Lithium:≤0.005%
Sodium:≤0.1%
DNase&RNase:None
Protease:None
性狀:粉末,。有吸濕性,。易溶于水,溶于乙,,不溶于,。相對密度3.99。熔點(diǎn)646℃,。1290℃升華,。沸點(diǎn)1303℃。折光率1.6418,。半數(shù)致死量(大鼠,,腹腔)1.5g/kg
用途:生化研究。點(diǎn)滴分析三價鉻和鎵,。無線電,、電視機(jī)真空管后的抽成真空。X射線熒光屏,。無線電反襯介質(zhì),。銫。氣相色譜固定液(高使用溫度450℃,,溶劑為水),,用于高溫色譜分析二聯(lián)、三聯(lián),。用于顯微鏡分析,,密度梯度離心
保存:RT