操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2,、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻。
7,、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無(wú)細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):PDTC (NF-κB抑制劑/抗氧化劑)
英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:1g|5g PDTC 的全稱(chēng)為Ammonium pyrrolidinedithiocarbamate 或Pyrrolidinedithiocarbamic acid, ammonium salt,,是一種可以通透細(xì)胞膜的NF-κB 活化(NF-κB activation)抑制劑,可以在多種細(xì)胞中抑制NF-κB 的激活,。PDTC 也是一種抗氧化劑(antioxidant),,也是一種金屬離子螯合劑(metal chelator),并且可以在酸性溶液中沉淀As, Bi, Cd, Co, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb, Sb, Sn, V, Zn 等重金屬,。PDTC可以誘導(dǎo)大鼠平滑肌細(xì)胞發(fā)生凋亡,,也可以抑制白血病細(xì)胞HL-60 發(fā)生凋亡。 PDTC 分子量為164.29,,分子式為C5H9NS2 · NH3,,CAS Number:5108-96-3。本產(chǎn)品為進(jìn)口分裝,,純度大于99%,。 PDTC 可溶于水(1mg/ml),在DMSO 中的溶解度可達(dá)到100mM,。 |
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會(huì)影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,,否則將會(huì)增加空白吸收,,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物,。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對(duì)較大,,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè),。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10,、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間,。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
大豆慢生根瘤菌末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體Human CCNL1 ELISA Kit山羊白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
多殺性巴氏桿菌8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體Human CD209 ELISA Kit山羊白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
粗柄羊肚菌補(bǔ)體C4a+C4b蛋白抗體Human Cathepsin H ELISA Kit山羊白介18(IL-18)免疫試劑盒
大腸埃希菌CD44V7抗體Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit山羊白介12(IL-12/P40)免疫試劑盒
變灰鏈霉菌CD44V10抗體Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit山羊白介10(IL-10)免疫試劑盒
秀珍菇CD44V4抗體Human BTN3A1 (Butyrophilin Subfamily 3 Member A1) ELISA Kit山羊阿黑皮原(POMC)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌緊密連接蛋白4抗體Human BBX(HMG box transcription factor BBX) ELISA Kit山羊γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
盔形畢赤酵母6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體Human BTNL2(Butyrophilin-like protein 2) ELISA Kit山羊β-脂蛋白(β-LP)免疫試劑盒
金橫裂鏈霉菌L型鈣通道蛋白抗體Human BCAS1 ELISA Kit山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒
乳明串珠菌電壓依賴(lài)性鈣通道Cav3.1抗體Human BTNL8 ( Butyrophilin-like protein 8) ELISA Kit山羊α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母緊密連接蛋白3抗體Human BubR1 (MAD3/BUB1-related protein kinase) ELISA Kit山羊toll樣受體2(TLR2)免疫試劑盒
露濕粘座孢霉(或露濕漆斑菌)磷化原癌基因c-Jun抗體Human BCAT1/ECA39 ELISA Kit山羊M型肌激(CKM)免疫試劑盒
殼囊孢屬磷化原癌基因c-Jun抗體Human BCL2L10 ELISA Kit山羊C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒
穗狀平臍蠕孢1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體Human BCL6(B-cell lymphoma 6 protein) ELISA Kit山羊C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒
芽胞桿菌8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體Human BRD9 (Bromodomain-containing protein 9) ELISA Kit山羊CD14分子(CDl4)免疫試劑盒
紫色直絲鏈霉菌磷化補(bǔ)體成分5受體1抗體Human C14orf28 (Dopamine receptor-interacting protein 1) ELISA Kit山羊Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫試劑盒
鴨瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRP2蛋白抗體試劑盒苦龍膽酯苷
芽孢桿菌屬菌種Bacillus│T. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激級(jí)P27蛋白試劑盒康普瑞汀磷二鈉
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:BRP0蛋白抗體試劑盒康普瑞汀
PDTC (NF-κB抑制劑/抗氧化劑)葡聚糖T200
其他葡聚糖D200,;右旋糖酐200
英文名稱(chēng):Dextran T200
其他英文名稱(chēng):Mucrose,;Glucose polymer
產(chǎn)品規(guī)格:BR,分子量20萬(wàn)
包裝:10克/100克
CAS號(hào):9004-54-0
分子式:(C6H10O5) n
分子量:~200000
級(jí)別:BR
鑒別:合格
干燥失重:≤7.0%
性狀:粉末,,不溶于乙,,在中性溶液中很穩(wěn)定,遇強(qiáng)及升高溫度下被水解,,在堿性溶液中端基能被氧化,。易溶于水,。無(wú)臭,無(wú)味,。其溶液可在100-115℃熱壓30-45min,。葡聚糖存在于某些微生物生長(zhǎng)過(guò)程中分泌的粘液中,。主要由D葡萄喃糖以α,1→鍵連接,,支鏈點(diǎn)有1-→2,1→3,,1→4連接,。隨著微生物種類(lèi)和生長(zhǎng)條件的不同,其結(jié)構(gòu)也有差別
用途:生化研究,。細(xì)胞研究,,沉淀反應(yīng),從全血中分離白細(xì)胞,。學(xué)研究,。滲透性研究。惰性膠體已占容積和生物細(xì)胞壁體積的測(cè)定,。
保存:RT,,保質(zhì)期5年