操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7,、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8,、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:拓撲異構(gòu)酶I抑制劑
英文名稱:Irinotecan hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg Irinotecan hydrochloride是一種拓撲異構(gòu)酶I(Topoisomerase I)抑制劑,,可被水解激活成SN-38,SN-38是Irinotecan的活性代謝物,。 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:100286-90-6 別名:CPT-11 hydrochloride;Camptothecin 11 hydrochloride 純度:99.75% 分子量:623.14 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1,、本試劑盒僅供科學研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸,。
7,、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8,、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9,、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
桿菌屬腸高血糖相關(guān)肽抗體Human TRIP4 ELISA Kit大鼠瘦(LEP)免疫試劑盒
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枯草芽孢桿菌生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體Human TOR3A(Torsin family 3 member A) ELISA Kit大鼠腎上腺能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒
溜曲霉生發(fā)中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體Human TOR1AIP1 ELISA Kit大鼠腎上腺(EPI)免疫試劑盒
紫褐牛肝菌Boletus│violaceofuscus W. F. Chiu 質(zhì)量規(guī)格:TLC五味子
: HBUM172183資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:AR歐當歸內(nèi)酯A
產(chǎn)朊假絲酵母Candida│utilis 質(zhì)量規(guī)格:99.99%,1-3mm千金子二萜二乙酰酰酯
拓撲異構(gòu)酶I抑制劑磷酰二肽
其他磷米;磷酰二肽鈉
英文名稱:Phosphoramidon disodium salt
其他英文名稱:N-(α-Rhamno-pyranosyl-phos-phono)-L-leucyl-L-tryptophan disodium salt,; N-(α-Rhamno-pyranosyl-oxy-hydroxy-phosphinyl)-Leu-Trp disodium salt
產(chǎn)品規(guī)格:超純,90%
包裝:5毫克
CAS號:119942-99-3
C23H32N3Na2O10P=587.47
級別:Ultra pure grade
含量:≥90.0% (HPLC)
比旋光度Optical Rotation (1.0%, Water):-27~-35°
Performance Test:合格
Purity (TLC):One spot
Loss on Drying:≤5.0%
性狀:淡黃色粉末,,溶于水、甲,、二甲基亞砜,,不溶于,、己烷、乙乙酯,、等有機溶劑,熔點173~178℃,,工作范圍:5-500uM
用途:生化研究。具有很強的抑制金屬肽鏈內(nèi)切的活性,。
保存:?20°C