詳細(xì)介紹
中文名稱:活細(xì)胞核染料吖啶橙
英文名稱:Acridine Orange,;AO
產(chǎn)品規(guī)格:25mg
發(fā)貨周期:1~3天
橙是一種熒光色素,,其檢測激發(fā)濾光片波長488nm。阻斷濾光片波長515nm,。它與細(xì)胞中DNA 和RNA 結(jié)合量存在差別,,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA 結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,,與RNA 結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光,。該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,,使核DNA 和RNA 染色,。 |
在熒光顯微鏡下觀察,橙可透過正常細(xì)胞膜,,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光,;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,,形成凋亡小體,。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒,;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失,。橙AO 常與溴化乙啶EB 合用雙染,因EB 只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。
用于細(xì)胞核染色時,推薦的橙工作濃度為0.1%,。一般孵育條件是室溫避光15 分鐘,。由于不同細(xì)胞對橙的攝取能力不同,該法不一定適用所有細(xì)胞,。
儲存:-20℃,,避光,有效期12月,。
注意事項(xiàng):
1,、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療,。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,,避免開蓋時試劑損失,。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,,否則會影響使用效果,。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果,。
5,、最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6,、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7,、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細(xì)胞,,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9,、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞,。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測,,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
百合(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithium citrate, tetrahydrate紅膜蛋白4.2抗體包裝100g
百兩金A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MU-Gal轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體包裝25g
百秋李(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MU-GLU內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體包裝500g
百蕊草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MUP, disodium salt, trihydrate環(huán)磷腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷交換因子1抗體包裝25g
百蕊草I/山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷/阿福豆苷(標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱: POPOP磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體包裝5g
柏子仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PPO上皮特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g
敗醬草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium glycolate內(nèi)皮2抗體包裝25g
斑蝥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Span* 60內(nèi)皮受體蛋白酪激B3抗體包裝1g
板藍(lán)根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Titanium (IV) oxide軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體包裝250mg
半邊蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triton X-405髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體包裝5g
半甘草異黃B英文名稱: Urinary trypsin inhibitor fragment雌激受體α抗體包裝25MG
半夏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zinc oxide內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白2抗體包裝1g
半枝蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4(5)-Methylimidazole鋅指蛋白521抗體包裝250mg
寶藿苷I,羊藿次苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aluminum hydroxide大腸桿菌埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6)包裝5g
寶藿苷II,;大花羊藿苷A,;意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium phosphate, tribasic , trihydrate植物延展-β包裝100mg
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:總含量>95% ,進(jìn)分痘帶狀皰疹病IgG試劑盒瑞香;7,8-Dihydroxycou
熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格:>98%;NK1受體拮抗劑雙氫睪試劑盒肉桂;Cinnamyl alcohol
圍小從殼Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR衰變加速因子試劑盒肉桂;Cinnamaldehyde
活細(xì)胞核染料吖啶橙芴甲氧羰酰氯
其他氯甲-9-芴基甲酯;9-芴甲氧羰酰氯,;氯甲-9-芴甲酯,;9-氯甲芴甲酯;9-芴甲基氯甲酯,;9-芴亞甲氧基甲酰氯
英文名稱:FMOC-C1
其他英文名稱:Chloroformic acid 9-fluorenylmethyl ester,;9-Fluorenylmethyl chloroformate
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:50克/250克/1公斤
CAS號:28920-43-6
C15H11ClO2=258.70
級別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):63-64°C
干燥失重:≤0.2%
性狀:灰粉末,,室溫下長期放置會緩慢分解,。易吸潮,易分解
用途:生化研究,。用于制備N-Fmoc基,,用于固相多肽合成。 也用于毛細(xì)管電泳
保存:2~8℃
操作規(guī)程:
1,、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物,。
3,、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,。
4,、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜,。
6,、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),,各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,,C 為對照細(xì)胞的OD 值,。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)