操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,,需根據(jù)細胞的大小,,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2,、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物,。
3、將96孔板在37℃,,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間,。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液,。
5,、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,,使MTT 還原為甲臜,。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,,用平板搖床搖勻,。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,,可以使用560-600nm 的濾光片),。
8、結(jié)果分析
a,、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),,各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD,。細胞的存活率以T/C%表示,,T 為加藥細胞的OD 值,,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b,、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:DNA合成抑制劑(Triciribine)
英文名稱:Triciribine 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 DNA合成抑制劑(Triciribine)圖片 產(chǎn)品貨號:M00432中文名稱:DNA合成抑制劑(Triciribine) 注:本品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:35943-35-2 別名:API-2;NSC 154020;TCN 純度:99.20% 分子量:320.3 儲存條件:-20℃,,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
注意事項:
1,、本試劑盒僅供科學研究使用,,不可用于診斷或治療。
2,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失,。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果,。
4,、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5,、最好使用一次性吸頭,、管、瓶或玻璃器皿,,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7,、需長時間保存可-20℃避光保存,。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,,從而影響檢測結(jié)果,。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙,、錫箔紙包住避光,。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物,。如果待測藥物有還原性,,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度,。如果該吸光度很小,,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,,則需要除去培養(yǎng)基,,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測,。
9,、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10,、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間,。
11,、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可,。
金龜子綠僵菌神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S抗體Human ANGPTL4(Angiopoietin-related protein 4) ELISA Kit甘油二酯(DAG)ELISA試劑盒
硫化物氧化假諾卡氏菌分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體Human PRB3(Basic Salivary Proline Rich Protein 3) ELISA Kit甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
金球菌神經(jīng)粘附蛋白NGN抗體Human BTC(Betacellulin) ELISA Kit甘露糖凝集受體(MBLR)ELISA試劑盒
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墨汁鬼傘軸索過度生長抑制因子B受體抗體Human BAFF(B-Cell Activating Factor) ELISA Kit甘露糖(MN)ELISA試劑盒
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桃干枯殼蕉孢菌突觸粘附分子1抗體Human VEGFR1(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit鈣轉(zhuǎn)運ATP2C型成員1(ATP2C1)ELISA試劑盒
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淺多色鏈霉菌磷化谷受體2B抗體Human ACE(Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit鈣調(diào)(CAM)ELISA試劑盒
紅色諾卡氏菌Nocardia│rubra 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
橄欖鏈霉菌Streptomyces│olivaceus 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR
: ATCC12228資源名稱: 表皮葡萄球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng),三合物
DNA合成抑制劑(Triciribine)焦磷鉀
其他焦磷四鉀
英文名稱:Potassium pyrophosphate
其他英文名稱:Potassium diphosphate;Tetrapotassium pyrophosphate
產(chǎn)品規(guī)格:AR,,99%
包裝:500克
CAS號:7320-34-5
K4P2O7=384.38
級別:AR
含量:≥99.0%
硫鹽:≤0.002%
氯化物:≤0.002%
砷:≤0.0005%
水溶液實驗:澄清透明
重金屬:≤0.002%
性狀:結(jié)晶粉末,,無臭或略帶氣味。易溶于水,,并緩慢水解,,在水中溶解度為59g/100ml,稍溶于乙,,在乙中為1g/100ml,。新配制的1%溶液pH為2.5,。在水溶液中水解形成葡萄糖與其內(nèi)酯的平衡溶液。密度:0.6
用途:生化研究,。
保存:RT,,保質(zhì)期2年