培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測,。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Skp2Inhibitor C1(SKPin C1)是特異的Skp2介導(dǎo)的p27降解抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途,! CAS號:432001-69-9 別名:SKPin C1 純度:98.80% 分子量:465.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用,。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
傘狀霉屬Aneurinibacillus sp.大鼠(trypsin)ELISA試劑盒
叢毛單胞菌Aneurinibacillus sp.大鼠β干擾(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒
糖化酵母Aneurinibacillus sp.大鼠β干擾(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒
黃傘Aneurinibacillus sp.大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒
胡椒枯萎病Aneurinibacillus sp.大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒
易變?nèi)墙湍?/span>Bacillus sp.大鼠可溶性瘦受體(sLR)ELISA試劑盒
巴氏醋桿菌羅旺亞種Bacillus sp.大鼠可溶性瘦受體(sLR)ELISA試劑盒
孢淡灰鏈霉菌Bacillus sp.大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒
多根硬皮馬勃Bacillus sp.大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒
大孢硬皮馬勃Bacillus sp.大鼠艾杜糖硫酯(IDS)ELISA試劑盒
釀酒酵母Bacillus sp.大鼠艾杜糖硫酯(IDS)ELISA試劑盒
大腸埃希菌Bacillus sp.大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
異常漢遜酵母Bacillus sp.大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
孔狀短小莖點(diǎn)霉Bacillus sp.大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
蠟狀芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
巨型艾美耳球蟲Bacillus sp.大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2/TNFα-IP8L2抗體產(chǎn)堿桿菌德干鏈霉菌
血小板生成受體抗體維氣單胞菌東方擬無枝菌
微管蛋白4α抗體希瓦菌冬蟲夏草屬
脫中胚蛋白抗體中華根瘤菌放線多孢菌屬菌種
p27降解抑制劑(Skp2 Inhibitor C1)N-乙烯基吡咯烷
其他 1-乙烯基-2-吡咯烷;N-乙烯基-2-吡咯烷,;1-乙烯基-2-吡啶烷,;N-乙烯基吡啶烷;乙烯基吡咯烷,;正乙基-2-呲
英文名稱: NVP
其他英文名稱: N-Vinyl-2-pyrrolidone,;-Vinyl-2-pyrrolidone;N-Vinylbutyrolactam
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
包 裝: 100毫升/500毫升/2.5升
CAS號:88-12-0
C6H9NO=111.14
級別:AR
含量:≥99%(GC)
相對密度:1.044~1.047
折光率:1.512~1.515
水分:≤0.05%
性狀:常溫下是一種無色或淡黃色略有氣味的透明液體,,易溶于水和其它多種有機(jī)溶劑,化學(xué)性質(zhì)活潑易水解和聚合,。對光敏感,。沸點(diǎn):92-95℃/11mmHg,;閃點(diǎn):95℃。含 氫氧化鈉或水做抑制劑
用途:生化研究,。在化妝品、洗滌品,、感光材料等諸領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用
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