詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:圣米吉爾海獅病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:San Miguel sea lion virus (SMSV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫,、避光,快遞免費(fèi)送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
呼吸道合胞病毒B組PCR檢測(cè)試劑盒
呼吸道細(xì)菌多重PCR檢測(cè)試劑盒
胡桃PCR檢測(cè)試劑盒
花生PCR檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
ZNF185: 鋅指蛋白185抗體 0.2ml
DHFRL1: 二氫還原酶樣1抗體 0.2ml
血管生成素-2抗體 Anti-ANG-2 hu, mo, rat, pig, dog, chi 0.1ml
Anti-ZNF217/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白217抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 0酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml
CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 細(xì)胞色素P450 3A4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠內(nèi)脂素(VF)ELISA試劑盒 ,,英文名: VF ELISA Kit
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISAKit 96T/48T
大鼠抑瘤素M受體(OSMR)免疫試劑盒 Rat Oncostatin-M-specific receptor subunit beta,OSMR ELISA kit
英文名稱HumanCCL2ELISAKit人CCL2規(guī)格:96T/48T
非同位素AP-BCIP/NBT法RNA北方雜交試劑盒5次
ELISAKitcath-D人組織D規(guī)格:48T/96T
圣米吉爾海獅病毒PCR檢測(cè)試劑盒streptomycin/BSA 偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 2mg
Anti-CEBP-alpha 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Oct-2 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
Tween 20 吐溫20 100ml
TFPI/LACI 英文名稱: 組織因子途徑抑制劑抗體 0.1ml
cIAP1 英文名稱: 凋亡抑制因子1抗體 0.2ml
Anti-CEBP-alpha 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。