詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:白鱘虹彩病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Shovenose Sturgeon Iridovirus(SSIV)PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融,。
運輸:低溫、避光,,快遞免費送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
牛流行熱病毒PCR檢測試劑盒
牛皰疹病毒3型PCR檢測試劑盒
牛特定基因序列PCR檢測試劑盒
牛瘟病毒PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
ZnT-1: 鋅轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 0.2ml
DHRS2: 脫氫酶/還原酶家族成員2抗體 0.1ml
0酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 Anti-phospho-APP 0.1ml
Anti-AFP/Biotin 化鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-eNOS(Ser1177) 0酸化合成酶3抗體(內(nèi)皮型) 規(guī)格 0.1ml
E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒 ,,英文名: BNP ELISA Kit
大鼠胰(ypsin)ELISA檢測試劑盒RatypsinELISAKit 96T/48T
人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)免疫試劑盒 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit
Ratmaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬10(MMP-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DMDC水500毫升
MousePeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISA試劑盒小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
白鱘虹彩病毒PCR檢測試劑盒CD14 人CD14Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DC-SIGNR/CD299 CD299抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Neprilysin 2 腦啡肽酶2抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit 人胰多肽 96T
Tenascin R 英文名稱: 腱糖蛋白R抗體 0.1ml
CLEC1/CLEC1A 英文名稱: C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體 0.2ml
Anti-DC-SIGNR/CD299 CD299抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。