詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:唾液鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Streptococcus salivarius PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
豬藍(lán)耳病病毒(高致病性)PCR檢測(cè)試劑盒
豬藍(lán)耳病病毒PCR試劑盒
豬痢疾密PCR檢測(cè)試劑盒
豬鏈球菌Ⅱ型PCR檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
小鼠0酸二酯酶12(PDE12)ELISA試劑盒 ,,英文名: PDE12 ELISA Kit
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit 96T/48T
大鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒 Rat Dein Maix Protein 1,DMP1 ELISA Kit
英文名稱RatHLA-1ELISAKit大鼠組織相容性抗原(HLA-1)規(guī)格:96T/48T
鈣離子膜通道二氫受體(DHPR)功能熒光檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitLp-PL-A2人脂蛋脂酶A2規(guī)格:48T/96T
EPOR peptide 紅細(xì)胞生成素受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
凋亡,、半胱胺酸激活抑制劑抗體 Anti-AVEN 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1125) 0酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
DMEM低糖培養(yǎng)液 250ml 國(guó)產(chǎn)
ZNF503 英文名稱: 鋅指蛋白503抗體 0.2ml
Desmin 英文名稱: 結(jié)蛋白抗體 0.1ml
凋亡,、半胱胺酸激活抑制劑抗體 Anti-AVEN 0.1ml
唾液鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒Caspase-7 人Caspase-7Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CLEC5A/MDL1 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit 人 96T
TBX1 英文名稱: 先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體 0.2ml
CXCL7/NAP-2/PPBP 英文名稱: 血小板趨化因子7蛋白抗體 0.1ml
Anti-CLEC5A/MDL1 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。