PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):蜱傳出血熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Tickborne Hemorrhagic Fever Virus(TBHFV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門(mén),。
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寨卡(zika)病毒核酸檢測(cè)試劑盒
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登革熱病毒4型(DFV-IV)核酸檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允?span>DNA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl)???1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 ,,英文名: ADH/VP/AVP ELISA Kit
大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T
人7α-羥化酶(CYP7A)免疫試劑盒 Human CYP7A ELISA Kit
RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GST融合蛋白陽(yáng)性菌落鑒定試劑盒20次
MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISA試劑盒小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-RRAD/FITC 熒光素標(biāo)記RRAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SP (Substance P) P物質(zhì)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 Anti-Metal ion transporter 0.2ml
phospho-Smad3 (Ser204) 英文名稱(chēng): 0酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml
Fascin-3 英文名稱(chēng): 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368) 0酸化0脂酰肌醇抗體 規(guī)格 0.1ml
SP (Substance P) P物質(zhì)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蜱傳出血熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(人:N端多肽),、內(nèi)臟脂肪素、 又稱(chēng):前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子,、內(nèi)肥素,、腹脂素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh P2Y4 P2Y4受體抗體 規(guī)格 0.1ml
CD86 Kit Rat 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
T2R60 英文名稱(chēng): 味覺(jué)受體蛋白家族2亞基60抗體 0.2ml
C3orf26 英文名稱(chēng): 3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框26抗體 0.2ml
Anti-ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。