相關(guān)產(chǎn)品:
斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒 Aeromonas punctataPCR.費(fèi)蘭杜病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Flanders VirusRTPCR.雞瘧原蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Plasmodium gallinaceumPCR
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:豬鞭蟲PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Trichuris suisPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
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儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允?span>DNA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl)???1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD40L ELISA Kit
大鼠B12(VB12)ELISA檢測(cè)試劑盒RatVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T
人蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒 Human PRG4 ELISA Kit
RatPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GMS10甲基化基因鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌10X100微升
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISA試劑盒小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-PTPRJ/CD148/DEP1/FITC 熒光素標(biāo)記CD148抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Recomb Protein A 重組蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
粘附分子整合素α5抗體 Anti-ITG-α5/CD49e 0.2ml
NTR3 英文名稱: 神經(jīng)降壓素受體3抗體(糖蛋白95) 0.2ml
FAAH1 英文名稱: 脂肪酸酰胺水解酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PPIG (Ser376) 0酸化親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體 規(guī)格 0.2ml
Recomb Protein A 重組蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
豬鞭蟲PCR檢測(cè)試劑盒IL-10 小鼠白介素-10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ERCC1 DNA切除修復(fù)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MT-ND5 NADH復(fù)合體5抗體 規(guī)格 0.2ml
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Striatin 4 英文名稱: STRN4蛋白抗體 0.2ml
C2orf69 英文名稱: 2號(hào)染色體開放閱讀框69抗體 0.2ml
Anti-ERCC1 DNA切除修復(fù)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml