詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:單端孢霉屬通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Trichothecium spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
腺伴隨病毒PCR檢測試劑盒 Adenoassociated Virus(AAV)PCR.貓庖疹病毒PCR檢測試劑盒 Feline Herpes VirusPCR.皮里陶病毒PCR檢測試劑盒 Pirital virus(PIRV)RTPCR
實(shí)驗(yàn)過程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
小鼠顆粒體蛋白(GRN)ELISA試劑盒 ,英文名: GRN ELISA Kit
人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA檢測試劑盒Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit 96T/48T
大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
英文名稱RatAdiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADT)規(guī)格:96T/48T
肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitFFA人游離脂肪酸規(guī)格:48T/96T
Anti-PTP-1B/FITC 熒光素標(biāo)記PTP-1B蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Recomb Protein G/FITC 熒光素(FITC)標(biāo)記重組蛋白-GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
粘附分子整合素β1抗體 Anti-ITG-β1/CD29 0.1ml
SOX10 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體 0.2ml
FRAS1 英文名稱: 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PPM1A(Ser375) 0酸化蛋酸酶2C亞型α抗體 規(guī)格 0.1ml
Recomb Protein G/FITC 熒光素(FITC)標(biāo)記重組蛋白-GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
單端孢霉屬通用PCR檢測試劑盒IL-13 大鼠白介素-13Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-alpha Defensin 1/3 防御素α1/3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nectin 3/CD113 細(xì)胞粘附分子3抗體(脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白3) 規(guī)格 0.1ml
Human Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit 人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1 96T
SULT4A1 英文名稱: 腦磺基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白4A1抗體 0.2ml
C1QL3 英文名稱: 補(bǔ)體C1qL3鏈多肽抗體 0.2ml
Anti-alpha Defensin 1/3 防御素α1/3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。