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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 產(chǎn)品僅用于科研 |
| 英文名稱 | Vibrio mimicusPCR | 儲存條件 | -20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融 |
| 分類 | PCR檢測試劑盒 |
猴型逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒 Simian TypeD Retrovirus(SRV)DPCR
猴病毒PCR檢測試劑盒 Simian Virus 40(SV40)40PCR
猴型逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒 Simian TypeD Retrovirus(SRV)DPCR
猴病毒PCR檢測試劑盒 Simian Virus 40(SV40)40PCR
詳細(xì)介紹
使用方法
一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,，分別為 7,，6，5,，4,，3，2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,，*用帶芯槍頭，下同）,。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL,，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
4. 換槍頭,，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個樣品,，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板）,，6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù),，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板）,，1 個用于PCR 陽性對照,。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
擬態(tài)弧菌PCR檢測試劑盒 | Vibrio mimicusPCR | 50T |
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后,，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
定量PCR方法：
熒光定量PCR探針法 | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針法即除了引物外另外設(shè)置一個探針，在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),，這個時候,，兩個平衡不發(fā)光，但是當(dāng)DNA通過引物合成的時候,，探針被折斷,，釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),，兩個距離較遠(yuǎn)，發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,，被機(jī)器收集到信號,，從而檢測基因的量 | 染料能夠與雙鏈結(jié)合，當(dāng)PCR擴(kuò)增的時候,，染料結(jié)合到DNA上,，從而發(fā)光，單個的染料不發(fā)光,，這樣就能收集到信號,，我們可以看出，染料法特異性不強(qiáng),，只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光,。 | 在快速PCR中，通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴(kuò)增,，且不會影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率,。快速循環(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,，這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸,。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/2至1/3，卻能維持較高的擴(kuò)增效率,。此外,，如果引物的退火和延伸溫度相差無幾，則可將它們合并為一步,，以進(jìn)一步縮短PCR時間,。這一過程也被稱為 兩步PCR法。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,，某些遺傳病及癌基因的分型鑒定,。多種病原微生物的同時檢測或鑒定，是在同一PCR反應(yīng)管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,，進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,。 |
相關(guān)產(chǎn)品：
節(jié)桿菌通用PCR檢測試劑盒 Arthrobacter spp.PCR.馬虻PCR檢測試劑盒 Gasterophilus spp.PCR.豬傳染性腹瀉病毒 Porcine Transmissible Gasteroenteritis Virus（TGEV）
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度
小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒 ,，英文名： CC16 ELISA Kit
大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA檢測試劑盒Ratbetacellulin,BTCELISAKit 96T/48T
人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)免疫試劑盒 Human LDL-IC ELISA Kit
Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
FITC標(biāo)記二抗POD轉(zhuǎn)換試劑盒10次
MouseSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Anti-PSCA /FITC 熒光素標(biāo)記抗前列腺干細(xì)胞抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG Whole serum 兔抗豬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
生長抑制因子基因1抗體 anti-ING1/p33 0.2ml
Rabbit anti-Bovine IgM whole serum 兔抗IgM抗血清 1ml
FAN1 英文名稱： 范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PRKD1(Tyr463) 0酸化蛋白C mu型抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG Whole serum 兔抗豬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
擬態(tài)弧菌PCR檢測試劑盒HA(Human Hyaluronic acid) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-IFABP 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAP4 微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml
RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit 人受體TNFRSF結(jié)合絲酸蘇酸2 96T
SQSTM1 英文名稱： 泛素結(jié)合蛋白P62抗體 0.1ml
Phospho-CaMKII (Thr286) 英文名稱： 0酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白2α抗體 0.1ml
Anti-IFABP 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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