使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,，分別為 7，6,，5,，4，3,，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,，*用帶芯槍頭,，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL,，試劑盒提供),，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
5. 換槍頭,，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管,、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管,。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板）,，6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,，并且只做 1 次重復(fù),，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板）,，1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,！

儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

定量PCR方法：

相關(guān)產(chǎn)品：
禽偏肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Avian Metapneumovirus(aMPV)RTPCR.瓜納圖巴病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Guaratuba VirusRTPCR.產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測(cè)試劑盒 Providencia alcalifaciensPCR
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀,?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度
小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 ,，英文名： GM-CSF ELISA Kit

大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit 96T/48T

人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)免疫試劑盒 Human LRP-5 ELISA Kit

ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲(NA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

F.solaniRFLP基因分析試劑盒20次

Mouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISA試劑盒小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 Anti-CXC-R1 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FLASH 英文名稱： 半胱酸8相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Vimentin (Ser56) 0酸化波形蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
木絲霉PCR檢測(cè)試劑盒VCAM-1 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-EEF2 (Thr56) 0酸化真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Myosin VIIa/DFNB2 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Human Free Protein S,FP-S ELISA Kit 人游離蛋白S 96T

Spectrin alpha chain, erythrocytic 1 英文名稱： 血影蛋白A鏈紅細(xì)胞型抗體 0.2ml

Calcitonin 英文名稱： 降鈣素抗體 0.1ml

Anti-Phospho-EEF2 (Thr56) 0酸化真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml