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大豆PCR檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-21 16:16:56瀏覽次數(shù):297

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 產(chǎn)品僅用于科研
儲(chǔ)存條件 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融 分類(lèi) PCR檢測(cè)試劑盒
大豆PCR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:馬流感病毒亞型PCR檢測(cè)試劑盒 Equine Influenza Virus(EIV)H3N8RTPCR
馬乳頭瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Equine Papilloma Virus(EPV)PCR
副牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Paravaccinia VirusRTPCR

詳細(xì)介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!

產(chǎn)品名稱(chēng)

分類(lèi)

規(guī)格

大豆PCR檢測(cè)試劑盒

PCR檢測(cè)試劑盒

50T

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2.
血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20
,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

詳1.png

定量PCR方法:

熒光定量PCR探針?lè)?/span>

熒光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探針?lè)闯艘锿饬硗庠O(shè)置一個(gè)探針,,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),,這個(gè)時(shí)候,兩個(gè)平衡不發(fā)光,,但是當(dāng)DNA通過(guò)引物合成的時(shí)候,,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),,兩個(gè)距離較遠(yuǎn),,發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,被機(jī)器收集到信號(hào),,從而檢測(cè)基因的量

染料能夠與雙鏈結(jié)合,,當(dāng)PCR擴(kuò)增的時(shí)候,染料結(jié)合到DNA上,,從而發(fā)光,,單個(gè)的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號(hào),,我們可以看出,,染料法特異性不強(qiáng),只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光,。

在快速PCR中,,通過(guò)縮減PCR步驟所需時(shí)間來(lái)完成更快的擴(kuò)增,且不會(huì)影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率,??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,這類(lèi)聚合酶在每個(gè)結(jié)合中可引入更多的核苷酸,。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時(shí)間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時(shí)間的1/21/3,,卻能維持較高的擴(kuò)增效率。此外,,如果引物的退火和延伸溫度相差無(wú)幾,,則可將它們合并為一步,以進(jìn)一步縮短PCR時(shí)間,。這一過(guò)程也被稱(chēng)為 兩步PCR法,。

多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定,。多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定,,是在同一PCR反應(yīng)管中同時(shí)加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時(shí)檢測(cè)多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,。


相關(guān)產(chǎn)品:
球孢白僵菌PCR檢測(cè)試劑盒 Beauveria bassianaPCR.前病毒PCR檢測(cè)試劑盒 HIV2 Provirus HIV2PCR.′羅斯肉瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Rous Sarcoma Virus(RSV)RTPCR
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,,蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘,。412000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后1530孵育10分鐘后,,于412000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?span>47000rpm離心5分鐘,。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),,先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度
小鼠免疫球蛋白樣EGF樣域酪酸1(Tie1)ELISA試劑盒 ,,英文名: Tie1 ELISA Kit

人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 96T/48T

大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒 Rat Insulin-like Growth Factors 1 Receptor,IGF-1R ELISA Kit

英文名稱(chēng)Human15-lipoxygenaseELISAKit15-脂加氧酶(15-LO)規(guī)格:96T/48T

糞便細(xì)胞DNA分離試劑盒50

ELISAKitAIL-R1人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1規(guī)格:48T/96T
Anti-Phospho-p63 (Ser395) /FITC
熒光素標(biāo)記0酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgG/Biotin 化兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

心肌肌鈣蛋白抗體 anti-CTn1 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FLT3L 英文名稱(chēng): FMS樣酪酸3配體抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-YAP1(Ser127) 0酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/Biotin 化兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
大豆PCR檢測(cè)試劑盒sTNF Alpha-RII(humen) 大鼠可溶性壞死因子-受體2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-DTNBP1 精神分裂癥易感基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NBL1/DAND1 神經(jīng)母細(xì)胞瘤抑瘤蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷3a 96T

SMAGP 英文名稱(chēng): 小細(xì)胞跨膜糖化蛋白抗體 0.1ml

CD6 英文名稱(chēng): CD6抗體 0.2ml

Anti-DTNBP1 精神分裂癥易感基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例),。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,,分別為 76,,5,,43,,2,。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,,下同),。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品,。放冰上待用。
4.
換槍頭,,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品,。放冰上待用,。
5.
換槍頭,,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品,。放冰上待用,。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管,、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管,。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復(fù),,則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),,1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照,。


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