詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:出血性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
巴氏阿米巴原蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Balamuthia mandrillarisPCR.松鼠猴皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Herpesvirus Saimiri(HVS)PCR.普氏立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒 Rickettsia prowazekiiPCR
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
小鼠免疫球蛋白D(IgD)ELISA試劑盒 ,,英文名: IgD ELISA Kit
大鼠雄(ASD)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAndrostenedione,ASDELISAKit 96T/48T
人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)免疫試劑盒 Human TERF1 ELISA kit
Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA南方雜交印跡消除試劑盒20次
Mouseplateletfactor3,PF3ELISA試劑盒小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-ProADM (Adrenomedullin)-N20 peptide /FITC 熒光素標(biāo)記腎上腺髓質(zhì)素前提N端20肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgA Whole serum 兔抗人IgA抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
白細(xì)胞介素-16抗體 anti-IL-16/LCF 0.2ml
Rabbit anti-mouse IgG-Fc fragment whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc段抗血清 1ml
Factor I light chain 英文名稱: 補(bǔ)體因子I輕鏈抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PTPN6(Ser591) 0酸化蛋白酪0酸酶1C抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-human IgA Whole serum 兔抗人IgA抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
出血性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒IGF- II 大鼠胰島素樣生長因子-ⅡMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-EDNRA 內(nèi)皮素受體A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Myotilin 肌收縮蛋白MYOT抗體 規(guī)格 0.1ml
CIC(Human circulating immune complex) ELISA Kit 人循環(huán)免疫復(fù)合物 96T
SNX2 英文名稱: 分選連接蛋白2抗體 0.2ml
CD19 英文名稱: CD19抗體 0.1ml
Anti-EDNRA 內(nèi)皮素受體A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。