詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:鉤狀螺旋體PCR檢測試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測試劑盒 Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)RTPCR.克雷伯菌通用PCR檢測試劑盒 Klebsiella spp.PCR.辛諾柏病毒PCR檢測試劑盒 Sin Nombre Virus(SNV)RTPCR
實(shí)驗(yàn)過程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 ,,英文名: vaspin ELISA Kit
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 96T/48T
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DH10B電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X100微升
MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA試劑盒小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-Phospho-FAK (Tyr861) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠0酸化粘著斑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗IgM (10或15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
纖維母細(xì)胞生長因子4抗體 Anti-FGF3/HSTF1/HBGF-4 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
FPGT 英文名稱: 巖藻糖10酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-SYN1(Ser549) 0酸化神經(jīng)突觸素1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗IgM (10或15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
鉤狀螺旋體PCR檢測試劑盒大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒 ,,英文名: α2-MG ELISA Kit
Mouse monocyte chemotactic protein 3 (MCP-3/CCL7) ELISA Kit 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠P53蛋白(mouse P53) 48T/96T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIGFBP-4ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4規(guī)格:48T/96T
通用型牛(BCV)試劑盒20次
ELISAKitPAI大鼠纖溶酶原激活物抑制因子規(guī)格:48T/96T
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。