詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:雞痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫,、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén),。
相關(guān)產(chǎn)品:
伯克氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 Burkholderia spp.PCR.熱帶利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 Leishmania tropicaPCR.偽中間型葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒 Staphylococcus pseudintermediusPCR
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,,英文名: ALB ELISA Kit
小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSmad7ELISAKit 96T/48T
人泛素蛋白(Ub)免疫試劑盒 Human ubiquitin,Ub ELISA Kit
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DAPI復(fù)染試劑盒50次
MouseorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISA試劑盒小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-TRAF1/FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PSD-95 突觸后密度蛋白95(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 Anti-TRAF6 0.2ml
SPRR3 英文名稱: 角質(zhì)蛋白β抗體 0.2ml
ELAVL2 英文名稱: ELAVL2蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Tyr895) 0酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml
PSD-95 突觸后密度蛋白95(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
雞痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒大鼠白細(xì)胞介素18(IL-18)ELISA試劑盒 ,,英文名: IL-18 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒
MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit人NOD樣受體規(guī)格:48T/96T
同位素真菌/酵母細(xì)胞蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒20次
ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受體規(guī)格:48T/96T
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。