詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:人GAPDH基因PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
登革病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 Dengue Virus(DENV)4RTPCR.黏孢子蟲(chóng)屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 Myxosporidia spp.PCR.差異脲原體PCR檢測(cè)試劑盒 Ureaplasma diversumPCR
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA試劑盒 ,英文名: Hsp-20 ELISA Kit
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit 96T/48T
人鈣結(jié)合蛋白S100A14 免疫試劑盒 Human S100A14 ELISA Kit
Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CASPASE-2蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISA試劑盒小鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-P-fscn1/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲(chóng)紫癜 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgM/Gold 金標(biāo)記鼠抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
植物延展素-β Anti-EXPB-2death inducer-obliterator-2 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
phospho-FAK(Ser722) 英文名稱: 0酸化粘著斑抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TAK1(Thr184) 0酸化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化1 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgM/Gold 金標(biāo)記鼠抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
人GAPDH基因PCR檢測(cè)試劑盒大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)ELISA試劑盒 ,,英文名: NFKBIA ELISA Kit
Mouse glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 小鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒
MouseNeuroglobin,NGBELISAKit 小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumaissuefactor,IFELISAKit人組織因子規(guī)格:48T/96T
通用型血液凝集分子纖維蛋白檢測(cè)法(Fibrometer)分析試劑盒50次
ELISAKitLDH大鼠乳酸脫氫酶規(guī)格:48T/96T
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍