詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):人黏附分子CD基因PCRPCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫,、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
鴨乙型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Duck Hepatitis B Virus(DHBV)PCR.新孢子蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒 Neospora spp.PCR.蛤弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 Vibrio tapetisPCR
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一,、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
小鼠溶血0脂酸受體3(LPAR3)ELISA試劑盒 ,英文名: LPAR3 ELISA Kit
豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineCoicosterone,COELISAKit 96T/48T
大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)免疫試劑盒 Rat ansthyretin,T ELISA Kit
英文名稱(chēng)HumanIerleukin-1α,IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)規(guī)格:96T/48T
動(dòng)物源性食品山羊源試劑盒20次
RatVitaminB6,VB6ELISA試劑盒大鼠B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
粘膜選址素抗體 Anti-MADCAM-1 0.2ml
SRGAP1 英文名稱(chēng): Rho GTP酶激活蛋白13抗體 0.2ml
FRMD2 英文名稱(chēng): FRMD2蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 0酸化蛋白C α/β2抗體 規(guī)格 0.1ml
MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
人黏附分子CD基因PCRPCR檢測(cè)試劑盒大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ 1-42)ELISA試劑盒 ,,英文名: Aβ 1-42 ELISA Kit
Mouse follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit 小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL) 48T/96T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-1(HumanIerleukin1)ELISAKit人白介素1規(guī)格:48T/96T
通用型離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次
ELISAKitACE大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶規(guī)格:48T/96T
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍