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人遺傳小腦共濟(jì)失調(diào)PCR檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2023-03-22 15:57:01瀏覽次數(shù):280

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 產(chǎn)品僅用于科研
儲(chǔ)存條件 -20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融 分類 PCR檢測(cè)試劑盒
人遺傳小腦共濟(jì)失調(diào)PCR檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:嗜人錐蠅PCR檢測(cè)試劑盒 Cochliomyia hominivoraxPCR
腦多頭囊蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Coenurus cerebralisPCR
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詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:人遺傳小腦共濟(jì)失調(diào)PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20
避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫,、避光,快遞免費(fèi)送貨上門,。

5.png

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集,、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20
,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
實(shí)驗(yàn)過程:

一,、試劑準(zhǔn)備

二、操作步驟

1. DNA模板
  2
.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無(wú)到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
  3
10×PCR Buffer
  4
2mM dNTPmix:含dATP,、dCTPdGTP,、dTTP2mM
  5
Taq

1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
  10×PCR buffer             5μl
  dNTP mixl                 4μl
 
引物110pM               2μl
 
引物210PM             2μl
  Taq
酶(2U/μl              1μl
        DNA
模板(50ng-1μg/μl
???1   μl
 
ddH2O                 50 μl
 
PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
 
 

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72 保溫7min,。
3
.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測(cè)或-20保存,。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。

注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。

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MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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