相關(guān)產(chǎn)品:
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:壞死性肝胰腺炎細(xì)菌(NHPB)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl)???1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1)ELISA試劑盒 ,,英文名: FGF1 ELISA Kit
豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigGrowthhormone,GHELISAKit 96T/48T
牛降鈣素(CALCA/CALC)免疫試劑盒 Bovine Calcitonin,CALCA/CALC ELISA kit
英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein4ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)-4(BMP-4)規(guī)格:96T/48T
動(dòng)物細(xì)胞/組織莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5次
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISA試劑盒大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-Omgp /FITC 熒光素標(biāo)記少突細(xì)胞髓0脂糖蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
周期蛋白依賴抑制因子1C抗體 Anti-Cdkn1c/p57/Kip2 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
FASP1 英文名稱: MaFF相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLAGL2 多形性腺瘤基因樣蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
壞死性肝胰腺炎細(xì)菌(NHPB)核酸檢測(cè)試劑盒大鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 ,,英文名: ANGPT1 ELISA Kit
Mouse aial naiuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanbeta2glycoprotein,Beta2-GPELISAKit人β2糖蛋白規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞D-葡萄糖法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitFAS/CD95大鼠凋亡相關(guān)因子規(guī)格:48T/96T