詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:梅恩君病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Main Drain Virus(MDV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸:低溫、避光,,快遞免費(fèi)送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
SHANK2: 富含脯酸突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體 0.2ml
EPS15R: 表皮生長(zhǎng)因子受體底物15抗體 0.2ml
周期素依賴性3抗體 Anti-CDK3 0.1ml
Anti-VPS18/FITC 熒光素標(biāo)記空泡分選蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GAB2 (Tyr452) 0酸化接頭蛋白Gab 2抗體 規(guī)格 0.1ml
CK16(Cytokeratin 16) 細(xì)胞角蛋白16抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠天冬酸轉(zhuǎn)酶(AST)ELISA試劑盒 ,,英文名: AST ELISA Kit
豚鼠血清(NO)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigniicoxide,NOELISAKit 96T/48T
牛內(nèi)皮型合成酶(eNOS)免疫試劑盒 Bovine Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit
英文名稱Human-TELISAKit人肌鈣蛋白-T(Tn-T)規(guī)格:96T/48T
動(dòng)物軟組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
RatP-SelectinELISA試劑盒大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
梅恩君病毒PCR檢測(cè)試劑盒6Ckine /CCL21/SLC Human 人淋巴組織趨化性細(xì)胞因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) 0酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NPRB 利肽受體B抗體 規(guī)格 0.2ml
MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過(guò)氧化物酶 96T
TTBK1 英文名稱: 腦源性tau蛋白抗體 0.2ml
C6orf58 英文名稱: 6號(hào)染色體開放閱讀框58抗體 0.2ml
Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) 0酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),,請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。