詳細(xì)介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:墨累谷腦炎病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Murray Valley Encephalitis Virus(MVEV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫、避光,,快遞免費送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
疏PCR檢測試劑盒
鵝包柔氏PCR檢測試劑盒
達(dá)氏疏PCR檢測試劑盒
伽氏疏PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
SLC14A1: 尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白抗體 0.2ml
ENPP5: 0酸酶/0酸二酯酶家族成員5抗體 0.2ml
神經(jīng)肽Y1受體抗體 Anti-NPY1R 0.1ml
Anti-Slc22A17/FITC 熒光素標(biāo)記可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser33) 0酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
BNP 腦素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠羧甲基賴酸(CML)ELISA試劑盒 ,,英文名: CML ELISA Kit
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 96T/48T
牛1免疫試劑盒 Bovine Coisone ELISA Kit
英文名稱HumanOsteocalcinELISAKit人骨橋素(Osteocalcin)規(guī)格:96T/48T
動物細(xì)胞/組織胞漿超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)分離試劑盒50次
Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISA試劑盒大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
墨累谷腦炎病毒PCR檢測試劑盒Metronidazole/OVA 偶聯(lián)雞卵白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 10mg
Anti-Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 0酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Oct-1 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
TMB substrate kit(3,、3、5,、5etramethylbenzidine) 四甲基胺顯色試劑盒(即用型工作液) 10ml
TRPV5 英文名稱: 辣椒素受體5抗體 0.1ml
phospho-CTNNBIP1 (Ser36) 英文名稱: 0酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 0.1ml
Anti-Phospho-CEBP alpha (Thr222/226) 0酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。