 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
|
—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
15201736385 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2023-03-24 08:52:08瀏覽次數(shù)：286
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
| 儲(chǔ)存條件 | -20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融 | 分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
使用方法
一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,，分別為 7,，6，5,，4,，3，2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,，*用帶芯槍頭，下同）,。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL,，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品,。放冰上待用,。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用,。
5. 換槍頭,，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品,。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品,。放冰上待用,。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管,、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。如果做定性分析,，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照,。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱(chēng) | 分類(lèi) | 規(guī)格 |
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測(cè)試劑盒 | PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T |
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
定量PCR方法：
熒光定量PCR探針?lè)?/span> | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針?lè)闯艘锿饬硗庠O(shè)置一個(gè)探針,，在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán)，這個(gè)時(shí)候,，兩個(gè)平衡不發(fā)光,，但是當(dāng)DNA通過(guò)引物合成的時(shí)候，探針被折斷,，釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),，兩個(gè)距離較遠(yuǎn)，發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,，被機(jī)器收集到信號(hào),，從而檢測(cè)基因的量 | 染料能夠與雙鏈結(jié)合，當(dāng)PCR擴(kuò)增的時(shí)候,，染料結(jié)合到DNA上,，從而發(fā)光，單個(gè)的染料不發(fā)光,，這樣就能收集到信號(hào),，我們可以看出，染料法特異性不強(qiáng),，只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光,。 | 在快速PCR中，通過(guò)縮減PCR步驟所需時(shí)間來(lái)完成更快的擴(kuò)增,，且不會(huì)影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率,。快速循環(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,，這類(lèi)聚合酶在每個(gè)結(jié)合中可引入更多的核苷酸,。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時(shí)間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時(shí)間的1/2至1/3，卻能維持較高的擴(kuò)增效率,。此外,，如果引物的退火和延伸溫度相差無(wú)幾,，則可將它們合并為一步，以進(jìn)一步縮短PCR時(shí)間,。這一過(guò)程也被稱(chēng)為 兩步PCR法,。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定和病原微生物，某些遺傳病及癌基因的分型鑒定,。多種病原微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定,，是在同一PCR反應(yīng)管中同時(shí)加上多種病原微生物的特異性引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時(shí)檢測(cè)多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,。 |
相關(guān)產(chǎn)品：
馬乳頭瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Equine Papilloma Virus（EPV）PCR
馬生殖泰勒氏菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Taylorella equigenitalisPCR
馬梭菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Clostridium equiPCR
馬泰勒梨形蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒原 英文名稱(chēng); Theileria equiPCR（Babesia equi)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度
小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)ELISA試劑盒 ,，英文名： proNGF ELISA Kit
小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1ELISAkit 96T/48T
人甘露糖凝集素受體(MBLR)免疫試劑盒 Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次
MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA試劑盒小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Anti-PEPT1/FITC 熒光素標(biāo)記腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-mouse IgG/Gold 金標(biāo)記羊抗小鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
雌激素受體β 抗體 Anti-ER-β 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
Phospho-FAK (Tyr407) 英文名稱(chēng)： 0酸化粘著斑抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser214) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-mouse IgG/Gold 金標(biāo)記羊抗小鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測(cè)試劑盒大鼠前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)ELISA試劑盒 ，英文名： PKR1 ELISA Kit
Mouse bradykinin (BK) ELISA Kit 小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISAKit 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGR-BetaELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體β規(guī)格：48T/96T
細(xì)胞單胺氧化酶B型(MAO-B)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次
Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
化工儀器網(wǎng)
化工儀器網(wǎng)