詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Pasteurella spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
相關(guān)產(chǎn)品:
小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒
米德爾堡病毒PCR檢測試劑盒
中東呼吸綜合征科研PCR檢測試劑盒
馬可尼小囊蟲PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一,、試劑準備 | 二,、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
SPINK1/SPINK3: 相關(guān)胰抑制劑1抗體 0.1ml
EXTL3: 多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體 0.2ml
活化受體4/前列腺細胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗體 Anti-PAR4 0.1ml
Anti-SREBP-1/FITC 熒光素標記調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Ser529) 0酸化細胞核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP40 ELISA Kit
豬胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒PorcineInsulin,INSELISAKit 96T/48T
大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)免疫試劑盒 Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit
英文名稱HumanIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT人白介素-11(IL-11)規(guī)格:96T/48T
動物脂肪組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10次
RatvonWillebrandFactor,vWFELISA試劑盒大鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
anti-CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX9 配對盒基因9抗體 規(guī)格 0.1ml
CD8A Kit Mouse 小鼠 CD8a ELISA配對抗體 ELISA
TNFSF9 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員9抗體 0.1ml
c-Myc tag 英文名稱: c-Myc tag標簽抗體 0.1ml
anti-CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。