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滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-14 11:22:37瀏覽次數(shù):171

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Aeromonas salmonicidaPCR 儲存條件 -20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融
分類 PCR檢測試劑盒    
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詳細介紹

使用方法
一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例),。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,,6,,54,,3,,2
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,,*用帶芯槍頭,,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
4.
換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
5.
換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8.
如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,,多出的一個用作樣品制備陽性對照管,、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,,在樣品制備室進行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 PCR 管,,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照,。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒

Aeromonas salmonicidaPCR

50T

詳1.png

儲存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集,、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2.
血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3.
細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20
,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

定量PCR方法:

熒光定量PCR探針法

熒光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探針法即除了引物外另外設(shè)置一個探針,,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團和淬滅集團,,這個時候,兩個平衡不發(fā)光,,但是當(dāng)DNA通過引物合成的時候,,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團和淬滅集團,,兩個距離較遠,,發(fā)光集團產(chǎn)生熒光,被機器收集到信號,,從而檢測基因的量

染料能夠與雙鏈結(jié)合,,當(dāng)PCR擴增的時候,染料結(jié)合到DNA上,,從而發(fā)光,,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,,我們可以看出,,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光,。

在快速PCR中,,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率,??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸,。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/21/3,,卻能維持較高的擴增效率,。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,,則可將它們合并為一步,,以進一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法,。

多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,,是在同一PCR反應(yīng)管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


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PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,,室溫放置5分鐘使其溶解,。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀,。混勻后,,47000rpm離心5分鐘,。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度
Dog IgM/Cy5.5 Cy5.5
標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml

FAM160B1 FAM160B1蛋白抗體 0.2ml

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 Anti-GRP94 0.1ml

Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化多聚合苷酸30酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236) 0酸化S6核糖體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

IgG1, kappa chain 兔抗小鼠IgG1k (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
小鼠組蛋白去乙?;?span>4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit

小鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(vWF)ELISA檢測試劑盒MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T

人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)免疫試劑盒 Human epidermal baseme membrane zone,EBMZ ELISA Kit

rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細胞DAPKINASE蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒11α-Hydroxycanrenone  中文名:  分子式:C22H28O4  度:98.0%  小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

Eplerenone  中文名:依普利酮  分子式:C24H30O6  度:98.0%  小鼠補體C3a(mouse C3a)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

Flumethasone  中文名:氟米松  分子式:C22H28F2O5  度:98.0%  小鼠補體C5a(mouse C5a)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  

3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid  中文名:  分子式:C19H29NO3  度:98.0%  小鼠B細胞瘤因子elisa試劑盒   小鼠B細胞瘤因子試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠B細胞瘤因子試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠B細胞瘤因子試劑盒,、小鼠B細胞瘤因子eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。

3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  中文名:  分子式:C13H13ClN2  度:98.0%  小鼠Ⅳ型膠原elisa試劑盒   小鼠Ⅳ型膠原試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠Ⅳ型膠原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠Ⅳ型膠原試劑盒、小鼠Ⅳ型膠原eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月,。


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