詳細介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
氣單胞菌通用PCR檢測試劑盒 | Aeromonas spp.PCR | 50T |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
定量PCR方法:
熒光定量PCR探針法 | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針法即除了引物外另外設置一個探針,,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團和淬滅集團,,這個時候,兩個平衡不發(fā)光,,但是當DNA通過引物合成的時候,,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團和淬滅集團,,兩個距離較遠,,發(fā)光集團產(chǎn)生熒光,被機器收集到信號,,從而檢測基因的量 | 染料能夠與雙鏈結(jié)合,,當PCR擴增的時候,,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,,單個的染料不發(fā)光,,這樣就能收集到信號,我們可以看出,,染料法特異性不強,,只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。 | 在快速PCR中,,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/2至1/3,,卻能維持較高的擴增效率,。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,,則可將它們合并為一步,,以進一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法,。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。 |
相關產(chǎn)品:
黃桿菌通用PCR檢測試劑盒
腦膜炎黃桿菌PCR檢測試劑盒
嗜冷黃桿菌PCR檢測試劑盒
弗萊克索病毒PCR檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,,室溫放置5分鐘使其溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度
Dog IgM/FITC FITC標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM13C1: FAM13C1蛋白抗體 0.2ml
H5N1流感病毒M2型抗體 Anti-H5N1-M2 0.2ml
Anti-SIAH2/FITC 熒光素標記泛素連接酶Siah2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RUNX1(Ser266) 0酸化急性髓細胞白血病1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-IgG 兔抗豬IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
小鼠組蛋白H4(H4)ELISA試劑盒 ,,英文名: H4 ELISA Kit
山羊白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒GoatIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T
犬(NO)免疫試劑盒 Canine niic oxide,NO ELISA Kit
英文名稱Mouse25(OH)D3ELISAKit小鼠25羥基D3(25(OH)D3)規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素(Closidiumperfringenscpa)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20次
RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISA試劑盒大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氣單胞菌通用PCR檢測試劑盒12-Aminolauric acid 中文名:12-氨基十二酸 分子式:C12H25NO2 度:98.0% 小鼠補體片斷elisa試劑盒 小鼠補體片斷試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠補體片斷試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠補體片斷試劑盒、小鼠補體片斷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
Amitriptyline 中文名:分子式:C20H24ClN 度:98.0% 小鼠補體蛋白elisa試劑盒 小鼠補體蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠補體蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠補體蛋白試劑盒,、小鼠補體蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-Aminophenyl phenyl sulfone 中文名:2-氨基二苯砜 分子式:C12H11NO2S 度:98.0% 小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T
8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 中文名:8-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S 度:98.0% 小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T
2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 中文名:2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2 度:98.0% 小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 96T/48T
使用方法
一,、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例),。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2,。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,,下同),。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
4. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個樣品,,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管,、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,6 個用于標準曲線。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復,,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,1 個用于PCR 陽性對照,。