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擬無枝菌酸菌通用PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-14 11:45:57瀏覽次數(shù):206

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應用領域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Amycolaptosis spp.PCR 儲存條件- 20℃避光保存,,避免反復凍融
分類 PCR檢測試劑盒    
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腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
腸球菌通用PCR檢測試劑盒
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詳細介紹

使用方法
一,、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例),。由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。
1.
標記 6 個離心管,分別為 7,,6,,54,,3,,2
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,,*用帶芯槍頭,,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,,試劑盒提供),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
4.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用,。
5.
換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品,。放冰上待用。
6.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品,。放冰上待用,。
二,、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8.
如果有 N 個樣品,,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管,、另一個用作樣品制備陰性對照管,。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,,在樣品制備室進行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復,,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,6 個用于標準曲線。如果做定性分析,,并且只做 1 次重復,,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),,1 個用于PCR 陽性對照。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

擬無枝菌酸菌通用PCR檢測試劑盒

Amycolaptosis spp.PCR

50T

詳1.png

儲存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2.
血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3.
細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20
,,避免反復凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

定量PCR方法:

熒光定量PCR探針法

熒光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探針法即除了引物外另外設置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團和淬滅集團,,這個時候,,兩個平衡不發(fā)光,但是當DNA通過引物合成的時候,,探針被折斷,,釋放出發(fā)光集團和淬滅集團,兩個距離較遠,,發(fā)光集團產(chǎn)生熒光,,被機器收集到信號,從而檢測基因的量

染料能夠與雙鏈結合,,當PCR擴增的時候,,染料結合到DNA上,,從而發(fā)光,,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,,我們可以看出,,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結合發(fā)光,。

在快速PCR中,,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率,??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結合中可引入更多的核苷酸,。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/21/3,,卻能維持較高的擴增效率。此外,,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,,則可將它們合并為一步,以進一步縮短PCR時間,。這一過程也被稱為 兩步PCR法,。

多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定,。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,。


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PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,,室溫放置5分鐘使其溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后1530孵育10分鐘后,,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊,。
RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?span>47000rpm離心5分鐘,。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488
標記的羊抗IgG 0.1ml

FLIP delta + gamma: 凋亡調(diào)節(jié)蛋白δ+γ抗體 0.2ml

胞漿-5-核苷酸酶-Ⅱ抗體 Anti-CD73 0.2ml

Anti-OAT-1/FITC 熒光素標記陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(抗人)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLC beta 3 0酯酶Cβ3抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-Chicken IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗雞IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒 ,,英文名: TFR2 ELISA Kit

犬肝素輔因子Ⅱ(HC)ELISA檢測試劑盒Canineheparincofactor,HCELISAKit 96T/48T

犬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)免疫試劑盒 Dog angiotensin I conveing enzyme(peptidyl-dipeptidase A)1(ACE)ELISA kit

英文名稱HA透明質(zhì)酸規(guī)格:96T/48T

超白金TAGDNA聚合酶200U

Ratglucocoicoidreceptor,GRELISA試劑盒大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
擬無枝菌酸菌通用PCR檢測試劑盒1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid  112811-72-0  中文名:  分子式:C14H11F2NO4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  99464-83-2  中文名:  分子式:C9H15ClO3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  78876-53-6  中文名:  分子式:C12H7ClOS  度:關鍵詞:  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

1-Chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  78876-52-5  中文名:  分子式:C13H9ClOS  度:97.0%  關鍵詞:  矢車菊屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

1-Benzylimidazole  4238-71-5  中文名:1-芐基咪唑  分子式:C10H10N2  度:98.0%      小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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