使用方法
一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7,，6,，5，4,，3,，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,，*用帶芯槍頭,，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL,，試劑盒提供),，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
5. 換槍頭,，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,，多出的一個用作樣品制備陽性對照管,、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析,，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照,。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測,，請按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

定量PCR方法：

相關(guān)產(chǎn)品：
馬鼻疽桿菌PCR檢測試劑盒

葡萄糖苷曼氏桿菌PCR檢測試劑盒

肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒

溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞,，室溫放置5分鐘使其溶解,。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀,。混勻后,，4℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,，測定RNA溶液 濃度和純度
Goat Anti-human IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗人IgG 0.3ml

FRG2B： FRG2B蛋白抗體 0.2ml

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體 Anti-Dnmt3a 0.1ml

Anti-PDE4D/FITC 熒光素標(biāo)記0酸二酯酶4D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-TRADD(Ser269) 0酸化壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Dog IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員5(TNFRSF5)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFRSF5 ELISA Kit

犬γ氨基(GABA)ELISA檢測試劑盒CanineGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T

犬雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒 Canine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit

英文名稱HumanLPSELISAKit人脂多糖(LPS)規(guī)格：96T/48T

超氧化物歧化酶(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒50次

Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
禽腎炎病毒型PCR檢測試劑盒2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S  度：98.0%  小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T  

Ampicillin Trihydrate  三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒   96T/48T           

2-Acetylfluorene  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒   96T/48T  

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  中文名：1-烯丙基-3,5-二吡唑  分子式：C8H12N2  度：98.0%  小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒   96T/48T  

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：99.0%  小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒   96T/48T